乳铁蛋白热稳定性研究
2014-07-13闫序东王彩云云战友
闫序东,王彩云,云战友
(内蒙古伊利实业集团股份有限公司技术中心,呼和浩特010110)
0 引 言
乳铁蛋白(LF)对热敏感,容易变性失活。关于乳铁蛋白的热稳定性,已有一些研究报道。HIROAKI等[1]研究了在酸性条件下牛乳铁蛋白的热稳定性,发现脱铁乳铁蛋白在酸性条件下非常稳定。CELIA等[2]研究了热对LF抑菌活性的影响,发现85℃保温10 min的热处理强度未降低LF的抑菌活性。LUIS等[3]研究发现72℃保温20 s或135℃保温8 s的热处理条件几乎不影响LF的铁结合能力,然而两种温度下更长的时间则会降低铁结合能力。MARIE等[4]研究了不同铁饱和度的LF在巴杀和UHT后的结构和抑菌活性变化,发现UHT造成LF的完全变性和抑菌性丧失,而巴杀对LF的抑菌活性没有影响。
通过文献报道可知,乳铁蛋白对热敏感,在其生产及应用过程中应注意保护其活性,以免失去功效。但以往的研究结果存在一些分歧甚至矛盾,因此有必要研究LF在乳制品加工常用热处理条件下的热稳定性,评价LF在实际加工过程中的结构和生物活性变化。
1 实 验
1.1 材料与设备
乳铁蛋白,E.coli K99,ANS试剂,DTNB; 磷酸二氢钠、SDS、丙烯酰胺等均为国产分析纯试剂。
UHT设备,水浴恒温振荡器,荧光分光光度计,电泳仪,TV-1810紫外-可见分光光度计。
1.2 方法
1.2.1 热处理
以蒸馏水溶解乳铁蛋白,配制为40 g/L(质量浓度)的乳铁蛋白溶液,进行不同强度的热处理,热处理条件分别为:63 ℃/30 min,72 ℃/15 s,85 ℃/15 s,85℃/10 min,95 ℃/5 min和 138 ℃/4 s,138 ℃/4 s的受热条件以UHT设备处理,其他受热条件在水浴锅中处理。热处理后将乳铁蛋白溶液冷冻备用。
1.2.2 浓度测定
采用还原SDS-PAGE和非还原SDS-PAGE分别测定热处理前后的乳铁蛋白质量浓度变化。……
