张悦，葛武鹏，贾玉良，陈瑛，王迁，秦立虎

(1.西北农林科技大学 食品科学与工程学院，陕西 杨凌 712100；2.陕西省质量技术监督局信息中心，西安 710006；3.陕西杨凌质量技术检测检验所，陕西 杨凌，712100；4.西安奶业科学研究所，西安 710065)

0 引 言

初乳所含营养物质极为丰富[1]，其含有大量的免疫球蛋白和其他很多免疫成份，如肽类、激素、酶、糖及生长因子等[2]。食品中的功能成分小分子量的生物活性多肽(＜1 000 g/mol)[3]，它们是通过体内胃肠消化或体外蛋白酶解后得到的具有生物活性的小的氨基酸序列[4，5]，显示出很多特殊功能特性，如抗菌性，抗高血压，免疫调节等[6]。

肿瘤坏死因子TNF-α已经确定是与炎症相关的支持因子，所以对于炎症的治疗策略是干预和降低TNF-α的浓度[7]，炎症疾病困扰着人们，仅有报道称乳铁蛋白素具有抗炎作用[8]，但很少有研究报道关于乳中的多肽成分的抗炎作用。

因此，本研究旨在分离纯化经模拟人体消化后牛羊初乳中的多肽，并检测了所获多肽的抗炎功能特性。

1 实 验

1.1 材料

1.1.1 原料

牛、羊初乳样品均为牛、羊产犊后第1天到第7天的乳；肽分离柱SuperdexTMPeptide 10/300GL；BV2神经小胶质细胞系。

1.1.2 试剂

Pepsin胃蛋白酶 (1∶10,000， 质量浓度5 g/L浓度0.01 mol/L的HCl)和trypsin胰蛋白酶(1∶250,浓度为5 g/L,pH=7.0磷酸盐缓冲液)，DMEM培养基 (粉剂)，双抗(含青霉素及链霉素和左旋谷氨酰胺)，FBS(胎牛血清)，LPS脂多糖 (血清类型 055∶B5)，小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫分析试剂盒，乙酸，色谱纯。

1.1.3 主要设备

AKTA PurifierTM10蛋白质层析仪，680酶标仪，冷冻离心机，3111二氧化碳培养箱，IF-300-150制冰机，高压立式蒸汽灭菌锅。

1.2 方法

1.2.1 乳样品的预处理