周万里，张京声，张世湘，郝彦玲

(中国农业大学 食品科学与营养工程学院，北京100083)

0 引 言

乳酸菌细菌素的抑菌范围不局限于近缘菌，也可杀死和抑制食品中的一些腐败菌和病原菌[1]。细菌素进入人体后能够被消化道内各种蛋白酶消化，低毒、无副作用。IIa类细菌素对单增李斯特氏菌具有强的抑制作用，因此对IIa类细菌素抑菌机制的研究成为热点[2-3]。

甘露糖磷酸转移酶系统IICD组分是IIa类细菌素的受体，细菌素结合受体，破坏细胞膜完整性，导致细胞死亡[4-6]。细菌素的同源免疫蛋白与受体-细菌素复合物的相互作用阻止细菌素对细胞的致死作用[6-8]。然而，免疫蛋白与受体结合的具体机制尚未阐述清楚。本研究在乳酸乳球菌中分别表达植物乳杆菌来源的mptIICD、肠膜明串珠菌来源的ptlIICD与免疫蛋白pedB，抑菌实验结果表明免疫蛋白在与受体结合中存在特异性识别。

1 实 验

1.1 材料

(1)菌株和质粒。产细菌素菌株植物乳杆菌BM-1分离自产于福建省的发酵鱼制品，对细菌素敏感的植物乳杆菌WQ0815和肠膜明串珠菌05-43、乳酸乳球菌NZ9000及质粒pNZ8148由本实验室保存。质粒pNZ8148的遗传图谱如图1所示。

图1 质粒pNZ8148的遗传图谱

(2)培养基和试剂。植物乳杆菌和肠膜明串珠菌培养采用MRS培养基，乳酸乳球菌培养采用GM17培养基。限制性内切酶、T4DNA连接酶、ExTaq DNA聚合酶和DNA Marker；质粒提取试剂盒；其他常规化学试剂均为国产分析纯。

(3)引物合成。引物由上海生工生物工程有限公司合成。引物序列及用途如表1所示。

表1 引物序列及用途

1.2 方法……

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