在高糖条件下锰超氧化物歧化酶刺激MSC提高血管内皮细胞活性的研究
2014-07-09张鹏纪亮沈雷王玉李萌刘琰
张鹏 纪亮 沈雷 王玉 李萌 刘琰
[摘要] 目的 观察高糖环境下,锰超氧化物歧化酶(MnSOD)刺激间充质干细胞(MSC)上清液对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖和趋化能力的影响。 方法 高糖MSC培养基条件下,100μg/L MnSOD刺激的MSC为实验组,未刺激的MSC为对照组,添加Akt阻断剂5μmol/L Tricirlbine为Akt阻断剂组,利用各组条件培养基在高糖1640培养基条件下,培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),使用MTT法观察各条件培养基对HUVEC增殖的影响,并利用细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验对HUVEC的趋化情况进行评估。 结果 与对照组相比,MSC实验组条件培养基促进HUVEC增殖;但是Akt阻断剂组HUVEC增殖能力降低;MSC实验组条件培养基作用的HUVEC趋化活动与对照组相比明显提高,但MSC实验组HUVEC趋化活动在Akt阻断剂组明显被抑制;MSC实验组条件培养基中VEGF含量比对照组明显提高。结论 高糖条件下MnSOD可以通过刺激间充质干细胞旁分泌VEGF等细胞因子对血管内皮细胞增殖、趋化等能力产生影响。
[关键词] 间充质干细胞;锰超氧化物歧化酶;旁分泌;人脐静脉血管内皮细胞
[中图分类号] R329.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2014)13-0013-03
全球糖尿病患者到2035年将增加5.92亿[1]。高血糖增加活性氧,致使皮肤血管内皮细胞代谢紊乱 [2]。MSC移植到糖尿病足伤口,可以加速伤口愈合[3],MnSOD在对抗活性氧的过程中发挥重要作用,如果利用MnSOD发挥对MSC的抗高糖损伤作用,将达到促进溃疡区血管新生之目的,促使MSC细胞疗法的广泛临床应用具有重要意义[4]。
1 材料与方法
1.1 细胞培养和分组
人骨髓间充质干细胞(MSC)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分别在正常或高糖MSC培养基中培养MSC为对照组,或添加100mmol/L MnSOD为实验组(MnSOD-MSC),添加5μmol/l Tricirlbine为Akt阻断剂组。……
