付小梅,孙艳朝,刘婧,吴志瑰,裴建国,彭水梅,谭道鹏

(江西中医药大学药学院,南昌 330004)

·药物研究·

蒙古苍耳子和苍耳子的抗炎镇痛作用比较*

付小梅,孙艳朝,刘婧,吴志瑰,裴建国,彭水梅,谭道鹏

(江西中医药大学药学院,南昌 330004)

目的 观察蒙古苍耳子不同提取物的抗炎镇痛作用,并与苍耳子进行比较。方法雄性昆明小鼠70只,分为空白对照组、阿司匹林组、苍耳子乙醇提取物组、蒙古苍耳子乙醇提取物组、蒙古苍耳子乙醚提取物组、蒙古苍耳子乙酸乙酯萃取物组、蒙古苍耳子正丁醇萃取物组,共7组,各10只,按500 mg·kg-1灌胃给药,采用小鼠热板实验观察其镇痛作用,二甲苯致小鼠耳肿胀实验观察其抗炎作用。结果在小鼠热板实验中,灌服苍耳子乙醇提取物和蒙古苍耳子各种提取物60,120及180min后,小鼠的痛阈值均延长(P＜0.05),苍耳子乙醇提取物组和蒙古苍耳子乙醇提取物组的小鼠痛阈值差异无统计学意义(P＞0.05),蒙古苍耳子乙醚提取物组和正丁醇萃取物组镇痛效果最好。在二甲苯致小鼠耳肿胀实验中,苍耳子乙醇提取物和蒙古苍耳子各部位提取物对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀均有明显的抑制作用(均P＜0.05),苍耳子乙醇提取物组和蒙古苍耳子乙醇提取物组间差异无统计学意义(P＞0.05),蒙古苍耳子乙醚提取物组和正丁醇萃取组抗炎效果最好(P＜0.05)。结论蒙古苍耳子有较强的抗炎镇痛作用,与苍耳子相似,且以乙醚提取物和正丁醇萃取部位抗炎镇痛效果最好。

蒙古苍耳子;苍耳子;抗炎作用;镇痛作用

苍耳子始载于《神农本草经》,为菊科植物苍耳(X.sibiricumPatr.)的干燥成熟带总苞的果实,为历版《中华人民共和国药典》收载的常用中药,具有镇痛、抗炎、抗微生物、抗氧化等作用,临床上常以单方、复方,内服或外用治疗急慢性鼻炎、鼻窦炎以及过敏性鼻炎等鼻科疾病[1-2]。资源调查发现,江西省境内普遍使用的是蒙古苍耳(X.mongolicumKitag.),商品药材调查发现蒙古苍耳果实作为中药苍耳子使用达一半以上,即临床上常将苍耳子与蒙古苍耳子进行混用。笔者对苍耳子和蒙古苍耳子进行了活性比较,同时比较蒙古苍耳子不同提取物以及不同萃取部位的抗炎、镇痛效果,初步明确其活性部位,为进一步深入探讨蒙古苍耳子药效成分及作用机制提供参考。

1 材料与方法

1.1 动物 清洁级雄性昆明种小鼠,体质量(20± 2)g,由江西中医药大学实验动物科技中心提供,使用许可证号:SYXK(赣)2009-0001,动物合格证号:SCXK (赣)2006-0001。饲养环境保持在约25℃,相对湿度约55%。

1.2 仪器 SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵:巩义市英峪予华仪器厂；RE-52A型旋转蒸发仪:上海亚荣生化仪器厂；CP124S德国赛多利斯电子天平；HH-4数显恒温水浴锅:国华电器有限公司。

1.3 试药及试剂 苍耳子、蒙古苍耳子购于江西樟树药材市场,经江西中医药大学药学院范崔生教授鉴定,分别为苍耳(X.sibiricumPatr.)、蒙古苍耳(X. mongolicumKitag.)的干燥成熟带总苞的果实,凭证标本存于江西中医药大学中药资源学科组。阿司匹林片为湖南新汇制药有限公司生产,批号:090513。所用乙醚、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇等均为分析纯。

1.4 样品的制备

1.4.1 苍耳子乙醇提取物样品制备 称取苍耳子100 g,粉碎,10倍乙醇加热回流提取3次,每次1.5 h,过滤,合并滤液,浓缩成浸膏,用0.5%聚山梨酯-80溶液定容至100 mL,制成生药浓度1 g·mL-1,备用。

1.4.2 蒙古苍耳子乙醇提取物样品制备 称取蒙古苍耳子200 g,粉碎,10倍乙醇加热回流提取3次,每次1.5 h,过滤,合并滤液,浓缩成浸膏,平均分成两份,其中一份用0.5%聚山梨酯-80溶液定容至100 mL,制成生药浓度1 g·mL-1,备用。

1.4.3 蒙古苍耳子乙醚提取物样品制备 蒙古苍耳子100 g,粉碎,10倍乙醚索氏提取3次,每次1.5 h,合并提取液,浓缩成浸膏,用0.5%聚山梨酯-80溶液定容至100 mL,制成生药浓度1 g·mL-1,备用。

1.4.4 蒙古苍耳子乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物样品制备 将“1.4.2”项的一份蒙古苍耳子乙醇提取浸膏用水混悬,依次分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取,各萃取3次,合并萃取液,分别浓缩成浸膏,得乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物。分别用0.5%聚山梨酯溶液将其定容至100 mL,制成生药浓度1 g·mL-1蒙古苍耳子乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物样品,备用。

1.5 小鼠热板法实验 按文献[3]方法,健康雌性昆明种小鼠,体质量(20±2)g,于小鼠热板测痛装置挑选基础痛阈在5～30 s的合格小鼠70只,随机分为空白对照组、阿司匹林组、苍耳子乙醇提取物组、蒙古苍耳子乙醇提取物组、蒙古苍耳子乙醚提取物组、蒙古苍耳子乙酸乙酯萃取物组、蒙古苍耳子正丁醇萃取物组,共7组,每组10只。禁食12 h以后,各组按500 mg·kg-1灌胃给药,对照组给予等量0.5%聚山梨酯-80溶液。每日给小鼠灌胃1次,连续3 d。分别于最后1次给药60,120,180,240 min后取小鼠置于(55.0±0.1)℃热板仪中,加热后作为热刺激,用秒表记录小鼠自投入热板至出现舔后足的时间(s)作为该小鼠的痛阈值(第1次舔足时间)。

1.6 对二甲苯诱导小鼠耳肿胀实验 按文献[4]方法,雄性昆明种小鼠70只,体质量(20±2)g,随机分为空白对照组(给予0.5%聚山梨酯-80)、阿司匹林组、苍耳子乙醇提取物组、蒙古苍耳子乙醇提取物组、蒙古苍耳子乙醚提取物组、蒙古苍耳子乙酸乙酯萃取物组、蒙古苍耳子正丁醇萃取物组,共7组,每组10只。除空白对照组和阿司匹林组外,其余各组每日按500 mg·kg-1灌胃给药1次,连续4 d,末次给药1 h后,于每只小鼠右耳两面涂二甲苯0.1 mL致肿,左耳不涂为正常耳。2 h后脱颈椎处死小鼠,沿耳廓基线剪下两耳,于同一部位用打孔器冲下耳片,直径8 mm,于分析天平上称质量。计算鼠耳肿胀度及抑制率。以两耳片质量之差为耳肿胀度,空白对照组和给药组耳肿胀度的差值除以空白对照组耳肿胀度为肿胀抑制率,比较各组间差异。

1.7 统计学方法 所有实验数据都采以均数±标准差()表示,组间比较采用t检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 小鼠对热刺激的痛阈值比较 见表1。给药前各组小鼠痛阈值差异无统计学意义(P＞0.05)。在给药后,除空白对照组外,各组小鼠60,120及180 min痛阈值均延长,表明苍耳子乙醇提取物和蒙古苍耳子乙醇提取物均表现出一定的镇痛作用(P＜0.05)；在给药后240 min后,作用不明显(P＞0.05)。同时苍耳子乙醇提取物和蒙古苍耳子乙醇提取物的痛阈值差异无统计学意义(P＞0.05)。表明蒙古苍耳子各种提取物都能表现出一定的镇痛作用(P＜0.05),其中以乙醚提取组和正丁醇萃取组镇痛效果最好。

2.2 小鼠耳肿胀情况比较 见表2。苍耳子乙醇提取物和蒙古苍耳子乙醇提取物对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用(P＜0.05),两者的乙醇提取物作用差异无统计学意义(P＞0.05)。蒙古苍耳子各部位提取物都对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用(P＜0.05),其中以乙醚提取组和正丁醇萃取组抗炎效果最好。

表1 7组小鼠对热刺激的痛阈值比较Tab.1 Comparison of pain threshold of thermal stimulation among seven groups of mice s,

表1 7组小鼠对热刺激的痛阈值比较Tab.1 Comparison of pain threshold of thermal stimulation among seven groups of mice s,

与空白对照组同时间点比较,*1P＜0.05Compared with the blank group at the same time point,*1P＜0.05

组别小鼠/只剂量/ (mg·kg-1)给药前给药后60 min 120 min 180 m in 240 min空白对照组10…18.56±3.37 19.19±3.51 18.90±3.70 17.90±4.02 18.00±2.13阿司匹林组10 500 18.90±3.11 25.46±1.48*123.32±2.86*122.78±3.40*121.98±2.21*1苍耳子乙醇提取物组10 500 18.39±2.51 20.39±2.52*120.56±1.92*119.34±4.23*118.02±2.98蒙古苍耳子正丁醇萃取物组10 500 18.90±3.11 22.46±1.48*121.53±2.67*120.56±3.76*118.29±2.34乙酸乙酯萃取物组10 500 18.56±3.37 20.21±3.51*119.34±3.70*119.70±4.00*118.80±2.19乙醚提取物组10 500 18.54±3.02 22.83±4.52*121.87±4.45*121.20±2.79*118.72±6.51乙醇提取物组10 500 18.54±3.02 21.72±5.60*121.03±4.40*120.83±2.70*118.32±4.60

表2 7组小鼠耳肿胀情况比较Tab.2 Comparison of ear swelling among seven groups of mice ,n=10

表2 7组小鼠耳肿胀情况比较Tab.2 Comparison of ear swelling among seven groups of mice ,n=10

与空白对照组同时间点比较,*1P＜0.05Compared with the blank group at the same time point,*1P＜0.05

组别剂量/ (mg·kg-1)耳肿胀度/ mg肿胀抑制率/ %空白对照组…9.00±1.61…阿司匹林组500 5.23±1.04*141.9苍耳子乙醇提取物组500 6.24±2.43*130.6蒙古苍耳正丁醇萃取物组500 5.41±1.73*139.9乙酸乙酯萃取物组500 5.90±3.01*134.4乙醚提取物组500 5.82±2.61*135.3乙醇提取物组500 7.02±1.32*122.0

3 讨论

菊科苍耳属植物全球约有25种,我国有3种及1个变种。我国苍耳属植物以蒙古苍耳和苍耳分布最广。与苍耳相比,蒙古苍耳的植株较大,结果率高,果实较大,其有效成分含量也较高[5-7]。临床应用中以蒙古苍耳的果实作为苍耳子入药的情况也普遍存在[8],特别是在南方地区,因此笔者对蒙古苍耳子乙醇提取物和苍耳子乙醇提取物进行抗炎镇痛研究。结果表明,两者的镇痛抗炎作用相似。并且对蒙古苍耳子各提取物进行镇痛抗炎比较,发现乙醚提取物和正丁醇萃取部位的抗炎镇痛效果最好,为蒙古苍耳子的进一步开发应用提供了科学依据。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:151.

[2] 王和英.验方苍耳草治疗慢性鼻炎[J].中国临床药理学与治疗学,1999,4(4):275.

[3] 陈奇.中药药理研究方法学[M].2版.北京:人民卫生出版社,2006:366-3673.

[4] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].3版.北京:人民卫生出版社,2002:911.

[5] 谭道鹏,吴志瑰,褚小兰,等.蒙古苍耳草的形态组织学研究[J].中国中药杂志,2007,32(13):1349-1350.

[6] 吴怀恩,韦志英,韦建华,等.HPLC测定炒苍耳子配方颗粒中绿原酸及咖啡酸的含量[J].中国现代应用药学, 2010,27(8):744-746.

[7] 吴建伟,付小梅,谭道鹏,等.苍耳子药材薄层鉴别与含量测定[J].江西中医药,2011,42(4):62-63.

[8] 尹锋,郑伟.复方苍耳子胶囊的制备与临床应用[J].医药导报,2005,24(10):932-933.

DOI 10.3870/yydb.2014.05.001

Comparative Studies of Anti-inflammation and Analgesic Effects Between X.Sibiricum and X.Mongolicum

FU Xiao-mei,SUN Yan-chao,LIU Jing,WU Zhi-gui,PEIJian-guo,PENG Shui-mei,TAN Dao-peng
(College of Pharmacy,Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine,Nanchang 330004,China)

ObjectiveTo investigate the anti-inflammatory and analgesic activities of different extracts fromX. mongolicumcompared with that ofX.sibiricum.MethodsSeventy male Kunming mices were random ly divided into seven groups:control group,aspirin group,the ethanol extracts ofX.sibiricumgroup andX.mongolicumgroup,the extracts fromX. mongolicumwith ether,ethyl acetate,andn-butyl alcohol group(n=10 each).The mice were adm inistrated with 500 mg·kg-1(p.o.)of different extracts.The hot-plate tests and the xylene-induced ear edema in mice were performed to observe the analgesic and anti-inflammatory activities,respectively.ResultsIn the hot-plate tests,the pain threshold from the extracts ofX.sibiricumand the different extracts fromX.mongolicumat 60,120,180 min were prolonged,and there was no statistically significant differences(P＞0.05)between the ethanol extracts fromX.sibiricumandX.mongolicum.The best analgesic activity was the ether andn-butyl alcohol extracts fromX.mongolicum.Meanwile,the ear edema from the extracts ofX.sibiricumand the different extracts ofX.mongolicumwere inhibited significantly(P＜0.05).There was also no significant differences between the ethanol extracts ofX.sibiricumandX.mongolicum(P＞0.05).The ether andn-butyl alcohol extracts from ofX.mongolicumshowed the best anti-inflammatory effect.ConclusionX.mongolicumexhibites significant anti-inflammatory and analgesic activities comparable to that ofX.sibiricum.The best anti-inflammation and analgesic activities are from ether andn-butyl alcohol extracts fromX.mongolicum.

X.mongolicum;X.sibiricum;Anti-inflammation;Analgesic effect

R282.71;R285.5

A

1004-0781(2014)05-0555-03

2013-05-09

2013-09-12

*江西省青年科学基金资助项目(20114BAB215044)；江西省教育厅科技项目(GJJ12517)

付小梅(1976-),女,江西临川人,副教授,硕士生导师,博士,主要研究方向为中药品质评价。电话:0791-87118983,E-mail:smilefxm@163.com。