李晓玲 王满侠 张博 原铂尧 张雯静 张淑娟

脑出血后神经功能恶化的原因有脑水肿的形成，神经细胞死亡等。凋亡在脑出血后神经细胞的损伤中发挥重要的作用。脑出血后线粒体释放细胞色素C，激活各种胱冬酶，导致蛋白酶级链切割最终发生凋亡，此为经典的caspase依赖性通路。近年来研究发现另一种重要的线粒体内介导凋亡的蛋白——AIF，其可以不依赖caspase-3的活性而通过另一条更为原始、更保守的途径来诱导凋亡。研究证实，AIF在神经细胞凋亡中发挥重要的作用[1]。亚低温对神经元的凋亡有明显的抑制作用[2]，但其具体机制尚未明确。目前关于亚低温对caspase依赖性通路的研究较多，但对AIF的研究尚不多见。本实验通过研究亚低温对非caspase依赖性通路中关键蛋白AIF的影响以进一步探讨其减轻神经元凋亡的机制。

1 材料和方法

1.1实验动物SD雄性大鼠108只，鼠龄10～12个月，体质量(275±25)g，由北京天坛医院动物房提供(合格证书编号-604821)。随机分为生理盐水组、脑出血组和亚低温+脑出血组(以下简称亚低温组)，每组再分为脑出血24 h、72 h 、7 d亚组，每个亚组12只。

1.2方法

1.2.1脑出血模型制备：以10%(质量浓度)水合氯醛按体质量400 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，俯卧位固定于动物脑立体定位仪(美国Benchmark)上。行头皮正中切口，切开皮肤，剥离骨膜，暴露前囟及冠状缝，前囟后1.0 mm中线右3.0 mm处为注射穿刺点(右侧基底节区尾状核)，用牙科钻穿透颅骨，用微量注射器(宁波三爱)抽取股动脉血50 μL，将注射器固定于立体定位仪上，将针尖置于穿刺点平颅骨，垂直进针5.5 mm后，以微量注射泵(美国Benchmark)缓慢注入自体血。……