战英 陈俊竹 赵一晖 张培军

吉林省卫生监测检验中心，吉林 长春 130062

保健食品中盐酸氨基葡萄糖的高效阴离子色谱测定方法分析

战英 陈俊竹 赵一晖 张培军

吉林省卫生监测检验中心，吉林 长春 130062

随着时代的发展，如今开始大量开发应用保健品，在保健品领域内，广泛重视盐酸氨基葡萄糖；本文通过试验，分析了如何对保健食品中盐酸氨基葡萄糖进行测定。

保健食品；盐酸氨基葡萄糖；高效阴离子色谱

糖蛋白广泛存在于人体和动物体内的关节组织中，而盐酸氨基葡萄糖是糖蛋白的一种天然成分，具有一系列的作用，可以对软骨及关节功能进行修复和维持，并且也可以有效地推迟骨性关节炎的发展。另外，在肝肾解毒方面，它可以提升婴儿肠道中双歧杆菌的增长速度，还有报道称，盐酸氨基葡萄糖可以对癌细胞的生长起到有效的抑制作用[1]。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

采用了美国生产的ICS2000离子色谱仪，将在线脱气装置的四元梯度泵、柱温箱、脉冲安培检测器以及淋洗液自动发生器、氨基酸分离柱等。采用了250 mmol/L NaOH；MiliQ超纯水，盐酸氨基葡萄糖标准品。在配合盐酸氨基葡萄糖标准溶液时，严格依据这样的程序来进行，对100 mg盐酸氨基葡萄糖标准品进行准确称取，然后用水稀释，使其达到100 ml，配成1 g/L的标准贮备液。

1.2 实验

色谱条件中采用积分脉冲安培检测器，Au工作电极和PH参比电极。流动相为250 mmol/ L NaOH，流速为每分钟0.25 ml，柱温为30℃。用水对盐酸氨基葡萄糖标准溶液进行稀释，促使其浓度达到0.1 g/L、0.2 mg/L、0.5 mg/L、5 mg/L，直接进样测定，横纵坐标分别为盐酸氨基葡萄糖标准溶液的质量浓度和峰面积，对标准曲线进行绘制。对样品进行适量称取，将60 ml水加入进来，进行15分钟的超声波提取。用水稀释，使其达到100 ml，利用滤膜进行过滤，取上清液，测定之前，需要用水进行稀释。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

在10～250 mmol/L浓度范围内，采取一系列方法改变氢氧化钠的浓度，并且分析样品测定结果受到本改变的影响程度，结果发现，在流动相方面，选取了250 mmol/L NaOH，可以有效分离盐酸氨基葡萄糖和样品中的杂峰，并且不需要再生和活化色谱柱，这样分析时间就得到了较大程度的缩短。另外，通过调查研究发现，保健食品中的盐酸氨基葡萄糖，有着较高的浓度，安培检测器测定的灵敏程度较高，需要高倍稀释过样品之后，方可以进行测定，可以将干扰因素给有效的消除掉。在20℃～40℃的范围内，分析了柱温对分离的影响情况，结果显示，盐酸氨基葡萄糖的测定，不会在较大程度上受到柱温的影响。

2.2 干扰实验

在干扰实验中选取了常见糖类和常见氨基酸，糖类包括黑糖、木糖、阿拉伯糖和乳糖等。在上文所述的色谱条件下，将一定量的干扰物质加入到2.0 mg/L盐酸氨基葡萄糖标准溶液中，不干扰测定定义为加干扰物的标准溶液和标准溶液两者的峰面积相对误差，在10%以内。经过实验分析，在此波形下，氨基酸没有响应。可以有效分离掉盐酸氨基葡萄糖和实验用到的部分糖类[2]。上文已经提到，保健食品中含有较高含量的盐酸氨基葡萄糖，在30%左右，经过样品高倍稀释过阿拉伯糖和鼠李糖之后，就不需要考虑它的干扰。

2.3 检出限、线性范围及精密度

对质量浓度分别为0.05 g/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L、3.00 mg/L的盐酸氨基葡萄糖标准溶液进行配置，在测定的时候，严格依据相关条件来进行，发现有较好的线性关系存在于这些浓度范围内的氨基葡萄糖中，那么就可以将它的线性回归方程给得出来：Y＝6.82X＋0.82（r＝0.999），其中峰面积和质量浓度分别用Y和X来表示，质量浓度的单位为mg/L；以三倍基线噪声对应的质量浓度计算方法的检出限为0.012 mg/L。在相应条件下，对同一标准溶液进行了连续测定，控制测定次数为八次，其中，0.69%、0.68%分别为峰面积和保留时间的相对标准偏差，测定了八份同一保健食品样品，测定结果只有较小的相对标准偏差。

2.4 加标回收率

在测定本底值方面，首先取12份平行样品，之后从中选出三份，然后将剩余九份加入到盐酸氨基葡萄糖标准溶液中，依据上文所述的方法，对盐酸氨基葡萄糖含量进行测定，平均加标回收率在96.5%～105.5%之间。

2.5 方法的对照试验

在同一保健食品中的盐酸氨基葡萄糖测定过程中，分别采用了本种方法和国家标准方法，结果显示相对偏差在10%以内。

3 结论

本文依据相关理论，对保健食品中盐酸氨基葡萄糖的高校阴离子色谱测定方法进行了构建，利用本方法来对保健食品中盐酸氨基葡萄糖进行测定，效果较好，加标回收率较高，可达到96.5%～105.5%，相较于国家标准方法的测定结果，相对偏差较小[3]，说明本方法在灵敏度和精密度方面较高，符合相关要求，可以有效分析保健食品中的总盐酸氨基葡萄糖。

[1]沈国，徐建忠，唐旭. 高效离子色谱法测定氨基葡萄糖类化合物[J]. 中国卫生检验杂志，2010，2（3）：123-125.

[2]吴燕，米亚娴. 离子色谱法及其在药物分析中的应用[J]. 天津药学，2011，2（4）：132-135.

[3]吴学军，金鹏飞，胡欣. 盐酸氨基葡萄糖片高效液相色谱测定方法的改进[J].中国药业，2012，2（1）：144-146.

TS207.3

B

1674-9308（2014）05-0093-02

10.3969/J.ISSN.1674-9308.2014.05.059