韩 凤， 李丛言， 关雪莲， 侯丽淳， 杨 慧

脑出血(intracerebral hemorrhage，ICH)是神经科常见病，致残率和死亡率高，严重地影响着人类健康。目前仍缺少有效的治疗手段，出血性脑损伤不仅由于血肿的占位效应及血肿对周边组织的直接破坏，继发性损伤也是出血性脑损伤的主要原因。近期研究认为细胞凋亡是出血性颅脑损伤的重要机制之一［1］，本研究探讨促红细胞生成素(EPO)对大鼠脑出血周边组织caspase-3表达及细胞凋亡的影响，为EPO治疗脑出血提供新的依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 Wistar大鼠112只，雌雄不限，体重200～250g，由佳木斯大学实验动物中心提供，实验动物被随机分为脑出血组、脑出血+EPO干预组各56只，两组分别分为出血前、出血后4h、6h、12h、24h、72h、7d 这 7 个时间点，每时间点各 8只。

1.1.2 实验药品及试剂 原位凋亡检测试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。促红细胞生成素购自山东阿华生物药业有限公司。其它试剂为实验室常用分析纯试剂。

1.2 方法

1.2.1 动物模型的制备及给药方法 采用立体定向自体血脑内注入法，按照包新民的《大鼠脑立体定位图谱》［2］进行定位，参照牛国忠［3］报导的方法及Deinsberger W等［4］的方法改进。Wistar大鼠均经10%水合氯醛(350mg/kg)腹腔注射麻醉，大鼠俯卧固定于立体定位仪上，头顶部剃毛消毒后正中矢状切开，切口长约1.5cm，钝性分离出前囟，在前囟后1mm，右旁4mm处用牙科钻钻一直径约1mm小孔。脑出血组大鼠，距鼠尾末端约2cm处剪断，取尾血50μl，将微量注射器推进至已钻孔内，进针5.5mm(相当于尾状核部)后先注入10μl，停针2min后注入剩余40μl血液，2min后退针1.5mm停留7min之后缓慢将针完全退出。……