王耀辉， 李国辉

脑缺血再灌注后脑水肿是缺血性脑卒中重要的病理过程，同时也是治疗缺血性脑卒中的关键，然而目前对脑缺血再灌注后脑水肿发生机制尚不完全清楚。水通道蛋白4(AQP4)广泛分布于中枢神经系统，在脑水肿的病理生理变化中发挥着重要的作用［1］。丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路是生物体内重要的信号转导系统，参与介导细胞生长、发育、分裂和分化等多种病理生理过程［2］。作为MAPK家族的一员，p38可在多种(缺血再灌注损伤、渗透压变化和生理应激等)病理生理条件下激活［3］，是脑组织损伤等病理改变的重要信号通路［4］。研究显示［5］，在液压冲击模型阻中，通过抑制p38磷酸化，可以降低星形胶质细胞AQP4的表达及细胞水肿程度。但p38 MAPK是否在脑缺血再灌注后脑组织AQP4表达及脑水肿形成中也发挥作用，国内外尚未见报道。本研究旨在观察大鼠脑缺血再灌注后脑组织磷酸化p38(p-p38)的水平，抑制p38的激活能否降低此过程脑组织AQP4的过表达及脑水肿程度，探讨其作用的机制。

1 材料和方法

1.1 主要药品和试剂 兔抗大鼠p38多克隆抗体、p-p38多克隆抗体及AQP4多克隆抗体(Santa Cruz)。羊抗兔IgG(北京中杉金桥)。p38特异性抑制剂SB203580(Selleck)。

1.2 实验动物分组和给药 SPF级雄性SD大鼠54只(体质量240～260g)，由广西医科大学实验动物中心提供，合格证号:SCXK(桂)2009-0002。随机分成3组:假手术组(sham组，n=18只)、缺血再灌注组(I/R组，n=18只)和p38抑制剂组(SB组，n=18只)。I/R组和SB组分别在制备大脑中动脉缺血/再灌注(MCAO/R)模型前15min通过舌下静脉注射10%DMSO(400μg/kg)和 p38抑制剂(SB203580，400μg/kg)。各组大鼠均于再灌注24h神经症状缺损评分后处死大鼠进行相关指标测定。……