黄芪注射液联合葛根素注射液对2 型糖尿病KKAy小鼠肾脏TGF-β1和BMP-7 表达的影响*
2012-12-23李姝玉柴新楼贾德贤苏玮莲
李姝玉, 柴新楼, 吴 莹, 贾德贤, 郝 钰, 苏玮莲, 王 谦△
(1北京中医药大学基础医学院,北京100029;2天津医科大学,天津300070)
糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病常见而难治的微血管并发症,是导致糖尿病患者死亡的主要原因之一。在DN 发病过程中,转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)起着关键的作用,可以促进糖尿病肾小球纤维化和间质纤维化过程的发生、发展。而骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP-7)是近年来发现的一种内源性肾脏保护因子,具有抗纤维化的作用,能够拮抗TGF-β1的作用。黄芪和葛根是治疗DN 的常用中药,能有效改善肾脏功能,然而,其作用机制尚缺乏充分了解。因此,本研究观察黄芪注射液联合葛根素注射液对2 型糖尿病肾病模型KKAy小鼠肾脏TGF-β1和BMP-7 表达的影响,探讨黄芪注射液和葛根素注射液治疗DN 的有关作用机制。
材 料 和 方 法
1 动物
SPF 级KKAy小鼠40 只,雄性,9 ~11 周龄,25 ~28 g,购自中国医学科学院动物中心,许可证号为SCXK(京)2005-0013,随机血糖≥13.9mol/L,确定为糖尿病小鼠。C57BL/6J 小鼠18 只,雄性,9 ~11周龄,23 ~25 g,许可证号为SCXK(京)2003-0003,购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验期间,动物自由饮水,KKAy小鼠给予高脂饲料(中国医学科学院动物中心提供),C57BL/6J 小鼠给予生长维持颗粒饲料(购自北京科奥协力饲料有限公司),以上动物均饲养在中日友好医院临床研究所实验动物中心屏障系统。
2 药物与试剂
黄芪注射液购自成都地奥九泓制药厂,规格为每毫升含生药2 g,产品批号为0608056。葛根素注射液购自浙江康恩贝制药股份有限公司,规格为每毫升含葛根素50 mg,产品批号为0601013。TGF-β1兔抗多克隆抗体和DAB 显色试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司;辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG 及高敏过氧化物复合酶购自武汉博士德生物工程有限公司。……
