杆状病毒表面展示丙型肝炎病毒结构蛋白及其对丙型肝炎病毒的检测*
2012-08-02金爱慧邹立林高基民吕建新
李 祥,金爱慧,邹立林,高基民,吕建新
(温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室,浙江省模式生物技术与应用重点实验室,浙江 温州 325035)
丙型肝炎是一种主要经血液传播的疾病,丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)慢性感染可导致肝脏慢性炎症性坏死和纤维化,部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌(hepatic celluler cancar,HCC)。因此,肝炎病毒的早期检测对治疗和防御疾病的恶化至关重要。
近年来,国内外对HCV的检测技术越来越先进,如PCR技术和基因芯片的应用等。HCV-RNA核酸扩增检测技术(nucleic-acid amplification technology,NAT)可精确地检测血清中HCV的载量,是预测和观察抗病毒效果的重要指标。但HCV RNA在达到峰值或重新出现前数天或数周内偶尔也可能检测不到[1]。此外,其它很多因素也影响患者的HCV检出率。目前,美国已采用了RIBA 3.0试剂检测技术来检测HCV,但是抗-HCV检测方法阳性率低。另外,由于“窗口期”的存在,仍有一定的漏检率[2]。
对于抗-HCV的检测,核心蛋白(core,C)和外膜蛋白(envelope,E)被认为能有效提高抗-HCV的灵敏度,但其对抗体的检出率依赖于抗原的获得方法,可能与抗原的构象表位有关[3-4]。而开发HCV抗体蛋白芯片检测技术已经成为科研人员关注的热点。在HCV检测中,加强和扩大对HCV不同编码区的抗体检测,是近年来该领域研究的一个新热点,它直接关系到检测技术的准确率和应用率。
杆状病毒表面展示(baculovirus surface display)系统是在对病毒基因组结构和功能深刻认识的基础上发展起来的。通过在病毒衣壳蛋白插入外源肽、与衣壳蛋白融合表达或与特异性的锚定部……
