王威 张红 刘平

角膜组织工程学是现代角膜疾病基础学研究的重要方法之一，角膜上皮细胞的体外培养更是研究角膜的生理学、病理学、免疫学、分子生物学以及临床应用极为重要的手段。现将近年来国内外角膜上皮细胞组织工程学发展现状及其在眼科临床应用中的进展作一综述。

1 角膜上皮的构建

1.1 种子细胞的选择 角膜上皮具有自我更新的能力，它是由位于角膜缘的干细胞增殖分化而来的。1986年Schermer等最先实验证明角膜上皮干细胞存在于角膜缘基底层的Vogt栅栏处;Tsubota等最早行异体角膜移植术;Pellegrini等［1］首次通过体外扩增角膜缘干细胞进行眼表重建，成为角膜缘干细胞移植发展史上的里程碑。在穿透性角膜移植的同期或分期联合施行角膜缘干细胞移植是目前最理想的移植术，尤其适合于角膜缘干细胞严重缺乏的病例。它弥补了当前角膜移植术只能取代混浊的角膜基质或失代偿的角膜内皮，不能迅速上皮化，不能阻止新生血管侵入、排斥反应重、手术失败率高的缺陷。因其在培养过程中所需角膜缘组织极少，对供眼无潜在威胁;培养的细胞可冻存，可用于二次手术;能抑制眼表急性病变发展，迅速恢复术眼正常的眼表结构;免疫原性低，符合人的自身发展状况，成为角膜上皮组织工程重建中最理想的种子细胞。目前研究中争论的焦点主要集中在角膜缘干细胞的特异标记物还不能明确［2］，没办法阐明角膜缘干细胞怎样进行分裂及定位，在临床试验中不能大量提纯与增殖等。……