刘楠梅 田 军 韩国锋 程 劲 黄 健 张金元

急性肾损伤(AKI)是临床常见病，尚无特异性治疗方法可以阻止其疾病进展。随着干细胞治疗技术的发展，为肾脏疾病的治疗研究提供了新的途径。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BM-MSCs)是骨髓中一大类具有多向分化潜能的多能干细胞，研究表明BM-MSCs移植是一种很有潜力的AKI治疗方法，归巢至肾脏的BM-MSCs可通过其分化及旁分泌功能促进AKI的修复［1-3］，但其改善能力有限，移植细胞向损伤肾脏的归巢数量有限是影响修复效率的原因之一。在BM-MSCs的定向归巢机制中，目前研究较多的是基质细胞衍生因子 1(stromal cell derived factor-1，SDF-1)/CXCR4轴［4］。促红细胞生成素(EPO)是一种能调节红系祖细胞生长分化的糖蛋白，其治疗AKI的有效性已被广泛证明［5-7］，但尚无相关研究表明这种药物是否会对BM-MSCs移植的定向肾脏归巢有益，从而增强移植治疗效果。本实验即构建缺血再灌注(I/R)诱导的AKI小鼠模型，行BM-MSCs移植，观察外源性EPO干预对移植BM-MSCs的AKI修复效应的影响，并探讨其可能机制。

材料与方法

动物与试剂 实验用C57BL/6小鼠由第二军医大学实验动物中心提供［动物生产许可证号SCXK(沪)2007-0003］，实验在第二军医大学实验动物中心完成［动物使用许可证号SYXK(沪)2007-0003］。C57BL/6小鼠BM-MSCs细胞株购自ATCC公司，5溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)及BrdU单克隆抗体购自Sigma公司，SDF-1单克隆抗体购自Santa Cruz公司，免疫组化检测试剂盒购自Jackson公司。

BM-MSCs的BrdU标记 大量传代BM-MSCs细胞，当细胞铺满瓶底60%(即达对数生长期)时，倾去DMEM培养液，加入含10μmol/L BrdU标记液的DMEM培养液继续孵育72h，免疫组化法对BrdU标记率进行鉴定。标记好的BM-MSCs备用。……