周继法 刘利根

（1 江苏省中医院，南京210029；2 中国药科大学，南京210009）

盐酸格拉司琼是一种强效高选择性5-HT3受体拮抗剂，临床广泛用于预防和治疗肿瘤放、化疗引起的恶心呕吐，有疗效好、半衰期长、剂量低等优点[1-2]。市场有盐酸格拉司琼注射剂和口服固体制剂产品，虽然口服制剂与注射剂疗效相同[3-4]，但临床常用注射剂。有些放化疗病人会因吞咽药物引起咽喉刺激而诱发恶心呕吐，因此不宜服用经济方便的口服止吐药。我院研制了盐酸格拉司琼口腔喷雾剂（批准文号：尚未批准），服药时将微量雾状药液喷入口腔随唾液自然吞咽，提高患者依从性。本文研究了盐酸格拉司琼喷雾剂的质量控制方法，为建立质量标准提供技术依据。

1 仪器和试剂

岛津LC-20A高效液相色谱仪，包括LC-20ADVP型泵、SPD-20AVP紫外-可见光检测器和LC solution工作站；KQ5200DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

盐酸格拉司琼对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100558-200301）；盐酸格拉司琼原料药（苏州长征-欣凯制药有限公司，批号：060901）；盐酸格拉司琼口腔喷雾剂（符合GMP要求的喷雾剂车间试制的样品，批号：081129，081130，081201；每瓶30喷，每喷含格拉司琼0.33mg）；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法和结果

2.1 鉴别 照含量测定项下，分别吸取20μL对照品溶液及供试品溶液注入液相色谱仪，供试品溶液主峰的保留时间与对照品溶液主峰的保留时间一致。

取供试品适量，按照《中国药典》2010年版二部附录III[5]项下氯化物的鉴别反应进行试验；另外，配制辅料溶液，同法试验。结果表明，供试品显氯化物鉴别反应，辅料溶液不显氯化物鉴别反应，辅料对盐酸格拉司琼的氯化物鉴别没有影响。

2.2 检查

2.2.1 性状、pH、最低装量检查 结果见表1。

2.2.2 每瓶总喷次 取供试品4瓶，照《中国药典》2010年版二部附录1L喷雾剂项下每瓶总喷次[5]检查法检查，3批样品的检查结果见表1，均符合药典的规定。

2.2.3 每喷主药含量 取供试品1瓶，照《中国药典》2010年版二部附录ⅠL喷雾剂项下每喷主药含量[5]检查法检查，照“2.3.2”项下测定方法进行检测，3批样品检测结果见表1。每喷主药含量检查结果均符合《中国药典》2010年版二部的相应规定，为标示含量的80%～120%。

表1 盐酸格拉司琼喷剂检查结果 (n =4)

2.3 含量测定

2.3.1 色谱条件 色谱柱：Hypersil氰基硅烷键合硅胶柱（250mm×4.6 mm×5μm，美国赛分科技公司）；流动相：含0.25%（mL•mL-1）三乙胺的0.05 mol•L-1醋酸钠溶液（用冰醋酸调节pH至6.0）-甲醇（50：50）；流速：1.0 mL•min-1；柱温：室温；检测波长：302 nm；进样量：20 μL；理论板数按盐酸格拉司琼峰计算不低于2000；分离度为 ＞1.5 。

2.3.2 测定方法 精密吸取供试品适量，加流动相稀释制成约含格拉司琼80μg•mL-1的溶液，即为供试品溶液。另取盐酸格拉司琼对照品适量，精密称定，用流动相稀释到含格拉司琼80μg•mL-1，为对照品溶液。分别精密吸取20μL的对照品溶液及供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算格拉司琼量（峰面积乘以0.8955）。

2.3.3 线性关系考察 精密称取盐酸格拉司琼对照品22.67 mg，流动相溶解并稀释到100 mL，制得226.7 mg•mL-1的溶液；分别取上述溶液1、2、3、4、5 ml，用流动相稀释至10 mL，即得22.67、45.34、68.01、90.68、113.35μg•mL-1的盐酸格拉司琼溶液。分别吸取上述5种浓度的供试品溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积A为纵坐标，以供试品浓度C为横坐标进行线性回归，得线性方程：

结果表明，盐酸格拉司琼浓度在22～114μg•mL-1范围内线性关系良好。

2.3.4 中间精密度试验 取供试品（批号：081129），按照不同时间、人员、设备的原则进行3d、2人、2台仪器的中间精密度试验，测定含量，计算含量平均值和SD、RSD。结果测得平均含量为99.7%，SD为0.22，RSD为0.22 %。

2.3.5 溶液稳定性试验 取供试品按含量测定的方法配制样品，室温放置，分别于0h、2h、4h、8h、12h取样20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，计算平均峰面积、SD和RSD。结果平均峰面积为3762249.800，SD为5203.884，RSD为0.14%。从溶液稳定性试验结果可知，本品溶液在12 h内稳定，能满足测定需要。2.3.6 重复性试验 取供试品，照含量测定方法制备6份供试品溶液，分别精密吸取20μL注入液相色谱仪，每份供试品重复进样2针，记录色谱图，按外标法计算含量平均值和RSD。结果含量平均值为99.1%，RSD%为0.47%。

2.3.7 回收率试验 按照含盐酸格拉司琼80%、100%、120%模拟处方，每个处方分别配制3批，分别取上述9个样品各3 mL，用流动相稀释至100 mL，作为供试品溶液。分别取各供试品溶液20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算测得量，再分别计算各自的回收率，结果见表2。

表2 回收率试验结果

2.3.8 样品测定 取3批供试品分别精密吸取适量，加流动相稀释制成约含格拉司琼80μg的溶液，为供试品溶液。另取盐酸格拉司琼对照品适量，精密称定，用流动相稀释到含格拉司琼80μg•mL-1，为对照品溶液。分别精密吸取20μL的对照品溶液及供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，结果乘以0.8955计算格拉司琼量，最后3批样品测定结果分别为标示量99.5%，99.4%，101.4%。

3 讨论

恶心呕吐是肿瘤化疗过程中最常见的副作用之一，发生率为65% ～85%。临床上格拉司琼联合各种药物治疗呕吐相关报道甚多。如王淑兰[6]观察中药穴位贴敷联合耳穴按压治疗顺铂引起延迟性呕吐的疗效，90例患者随机分为治疗组和对照组。对照组给予格拉司琼3mg，静滴，地塞米松5mg，静滴，均每日1次，至化疗结束；治疗组在对照组方案基础上加用自制中药膏剂穴位贴敷联合耳穴按压，至化疗结束后5天，共化疗2个周期。结果治疗组止吐有效率为93.3%，对照组为71.1%，两组疗效差异有统计学意义 (P＜0.01)。

多项临床研究报道证实[7-9]，格拉司琼口服与静脉给药同样有效，口服后药物更易通过近端肠黏膜吸收而接近外周5-HT3受体的位置，从而能更有效地发挥抗呕吐作用。格拉司琼静脉给药的常用剂量是每天3mg，而口服常用剂量仅每天2mg，但疗效与静脉给药相当[10-11]。

市售盐酸格拉司琼口服固体制剂的剂量是每次1mg（以格拉司琼C18H24N4O计），每天2次，化疗前1 h和间隔12 h各服1次。盐酸格拉司琼口腔喷雾剂采用手动泵定量喷雾给药，选用计量精密的药用小转臂喷头喷雾瓶，设计为每喷0.13 mL，每次给药3喷，每喷含格拉司琼0.33mg，每瓶标示装量3.9 mL（30喷）。研究显示，盐酸格拉司琼口腔喷雾剂的每喷主药含量和每瓶总喷次都能很好控制。供试品采用苯甲酸钠为防腐剂，苯甲酸钠在pH5.0以下抑菌活性强。有研究显示[12-13]，盐酸格拉司琼注射液在pH值4.5～7.5之间稳定，市售盐酸格拉司琼注射液的pH值范围为4.0～6.0。因此，我们将盐酸格拉司琼口腔喷雾剂pH值调节为4.7左右，既可有效防腐，又能保证制剂的稳定。

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