皱纹盘鲍内脏β-1,3-葡聚糖酶的提取及其酶学性质研究
2012-11-15宫国君朱蓓薇杨静峰米云龙
宫国君,朱蓓薇,杨静峰,米云龙
(大连工业大学食品学院,辽宁大连116034)
皱纹盘鲍内脏β-1,3-葡聚糖酶的提取及其酶学性质研究
宫国君,朱蓓薇,杨静峰*,米云龙
(大连工业大学食品学院,辽宁大连116034)
从鲍鱼内脏提取β-1,3-葡聚糖酶粗酶并研究其酶学性质。以昆布多糖为底物监控酶的活性。鲍鱼内脏经匀浆后,采用3倍体积0.1mol/L的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(pH6.0)浸提12h。浸提液经离心后收集上清液,并采用60%饱和度的硫酸铵对上清液中的蛋白进行盐析沉淀得β-1,3-葡聚糖酶粗酶。研究表明,粗酶中β-1,3-葡聚糖酶的最适反应温度为40℃,酶活力在40℃以下稳定;酶的最适pH为6.0,酶活力在pH4.0~7.0范围内稳定。Mn2+能明显激活酶活力,而Cu2+、Fe3+、Hg+对酶活力有抑制作用,其中Fe3+的抑制作用最强;亮肽酶素和1,10-菲啰啉对酶活力有明显的抑制作用,而E-64对酶活力有一定的激活作用;此酶对海藻酸钠也有一定水解能力。
鲍鱼,β-1,3-葡聚糖酶,酶学性质
β-1,3-葡聚糖酶(EC3.2.1.39)是一类能够特异性水解β-1,3糖苷键的水解酶。可用于饲料及啤酒工业[1-2]、增加多糖溶解性[3]、制备酵母原生质体[4]、植物病害防治等方面[5]。该酶广泛存在于微生物,如真菌[6]、细菌[7]、放线菌[8]等,植物如小麦[9]、青稞[10]、天麻[11]等和动物中。海洋中β-1,3-葡聚糖酶主要分布于海洋无脊椎动物。赵军岗等已从海参肠道中提取分离出此酶[12],BACHMAN E S等对海参(Strongylocentrotus purpuratus)卵中的β-1,3-葡聚糖酶分子量等性质进行了研究[13]。另外Svetlana N等从扇贝(Mizuhopecten yessoensi)分离纯化出β-1,3-葡聚糖酶并研究了该酶基因的克隆与表达[14]。同样是海洋动物的鲍鱼是一种海洋单壳软体贝类,具有很高的经济价值和营养药用价值[15]。……
