张茂海 张 琳 陆玲娜 宋立敏

胆红素是血红素的主要代谢产物，易被氧化剂作用发生氧化，见光易分解，是临床实验室比色试验中最常见的干扰物质之一。抗胆红素干扰实验已被确定为医学检验方法性能评价中干扰实验的重要项目［1］。目前，一些商品化试剂盒加入氧化剂后，降低了胆红素对比色反应的干扰，但大大增加了试剂成本。本文采用蓝光照射加速血清样本中胆红素分解，并观察蓝光照射前后常规生化指标检验结果的变化，探讨蓝光照射改善胆红素对常规生化检测干扰的效益。

1 资料与方法

1.1 标本及分组

选取经检测直接胆红素（DB）升高（＞100μmol／L）的新鲜血清标本40例，设为DB升高组；选取间接胆红素（IB）升高（＞100μmol／L）的新鲜血清标本40例，设为IB升高组，同时选取总胆红素（TB）、DB、IB均低于参考值上限的新鲜血清标本40例设为正常对照组。

1.2 仪器与试剂

美国贝克曼公司生产DXC800全自动生化分析仪；北京中西泰安技术服务有限公司生产ND14－XHZ－90新生儿黄疸治疗仪／蓝光治疗仪（每只蓝光灯管功率20W，共4只）。

高密度脂蛋白胆固醇（HDL）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL）检测试剂和校准品由日本第一化学生产，批号20110935；TB、DB、总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、r－谷氨酰转移酶（r－GT）、葡萄糖（Glu）、肌酐（Cre）、尿素（Urea）、尿酸（UA）、胆固醇（Cho）、三酰甘油（TG）、钾离子（K＋）、钠 离 子 （Na＋）、氯 离 子 （Cl－）、钙 离 子（Ca2＋）、无机磷（Pho）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LD）检测采用贝克曼公司原装试剂及配套校准品（批号：M907396）。质控品由伯乐公司（Bio－rad）提供（批号：14171／14172）。

1.3 蓝光照射及生化指标检测方法

全自动生化分析仪进行日常维护，按标准操作规程进行设备校准，常规检测双水平室内质控品，在保证质控结果在控的情况下：（1）分别测定蓝光照射前后对照组、DB升高组和IB升高组血清样本的TB、DB、IB浓度；（2）分别测定各组血清样本蓝光照射前后的 TP、Alb、ALT、AST、ALP、r－GT、Glu、Cre、Urea、UA、Cho、TG、HDL、LDL、K、Na、Cl、Ca、Pho、CK、LD等的水平变化。蓝光照射方法：将三组血清样本置于密封、透明的尖头塑料管内，放置蓝光灯下，打开4只灯管照射2h，同时使用空调控制室内温度为20℃。

1.4 统计学处理

各组样本蓝光照射前后TB、DB、IB测定结果以均值±标准差（s）表示，并进行组内差异显著性t检验。分别计算各组样本照射前后生化指标测定结果的均值偏差（Bias%）＝｜（C1－C0）｜×100%／C0（C0表示照射前测定结果均值，C1表示照射后测定结果均值），再对三组偏差数据进行方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 蓝光照射前后各组血清胆红素水平变化

三组标本经蓝光照射后，血清中胆红素浓度均有显著变化，与照射前比较差异有统计学意义（P＜0.01），见表1。

2.2 各组蓝光照射前后生化指标测定结果的均值偏差比较

表1 蓝光照射前后三组样本血清中胆红素水平变化（s，μoml／L，n均＝40）

表1 蓝光照射前后三组样本血清中胆红素水平变化（s，μoml／L，n均＝40）

注：与照射前比较，1）P＜0.01

DB升高组照射前 照射后IB升高组照射前 照射后对照组照射前 照射后TB浓度 151.30±17.41 79.80±13.341） 316.60±26.49 147.10±16.541） 10.70±2.35 3.00±0.811）DB浓度 127.10±15.73 71.80±12.951） 21.70±3.55 115.00±17.271） 5.50±2.22 2.50±0.711）IB浓度 24.20±4.34 8.08±1.561） 294.90±25.74 32.10±5.941） 5.20±2.34 0.50±0.221）

结果表明，对照组经蓝光照射后，LD浓度显著升高，出现较大偏差，其它20个指标的均值偏差较小，提示蓝光照射对正常水平胆红素标本的绝大多数生化指标测定无明显影响。而DB升高组和IB升高组经蓝光照射后大部分指标测定值显著降低，均值偏差明显大于对照组（P＜0.05或P＜0.01），提示蓝光分解高胆红素能显著改善生化指标测定值的偏离程度。见表2。

表2 蓝光照射前后各组样本生化指标测定结果偏差（%，n均＝40）

3 讨 论

胆红素是一种具有还原性的色源性物质，是血红素的代谢产物。在光照射作用下，可由天然的反式双键结构（或Z构型）转变为顺式双键（或E构型），临床利用光疗法治疗新生儿黄疸即是基于这一原理［2］。在临床实验室生化检验工作中，经常遇到高胆红素血清样本对部分检验指标产生严重干扰，因此胆红素干扰试验已被全国临床检验操作规程［1］列为检测系统方法学评价的必做试验之一。胆红素对比色反应的干扰主要表现为呈色性干扰和还原性干扰，例如在UA、TG、TC等检测中胆红素对偶联终点比色法反应可产生还原性干扰，以及在TP、Pho等终点比色法检测中产生样本本底颜色干扰等。有关胆红素对不同检测项目的干扰特性已被实践充分证实并相继有文献报道［3～9］。目前，有部分试剂中添加了针对胆红素的抗干扰成分，旨在降低其干扰［10～12］，但抗干扰成分浓度过大有可能对主体反应产生影响，而且对于出现超过试剂抗干扰阈值的特殊黄疸标本，也没有妥善的解决方案。

本文结果显示，采用蓝光治疗仪对血清样本照射2h，可加速分解血清中胆红素达39%到90%左右，但值得注意的是IB升高组经照射后DB水平显著升高，这可能与IB经光照后可部分发生异构变化，大量转化为DB相关［2］，其原因有待进一步证实。对照组生化测定结果显示，蓝光照射2h后，除LD之外的其它指标（20项）均值偏差均无统计学意义，而DB升高组和IB升高组蓝光照射后测定结果中大多数指标显著降低，均值偏差明显大于对照组，提示两组样本中存在高胆红素的不同程度影响，而蓝光照射可以明显降低其影响程度。因此，短时间蓝光照射血清样本可作为临床化学实验室针对黄疸标本干扰的一种预处理手段，且能与添加抗干扰成分试剂形成良好的互补，值得推广使用。

1 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程（第三版）［M］.南京：东南大学出版社，2006：72.

2 张秀明主编.现代临床生化检验学［M］.北京：人民军医出版社，2001：1 202

3 韩志钧，黄志锋，卢业成等主编.临床化学常用项目自动分析法［M］.沈阳：辽宁科学技术出版社，2005：1 239

4 王永明，谢金荣.介绍一种消除胆红素干扰的方法［J］.江西医学检验，2003，21（3）：169～170.

5 高 勇.血清直接、间接胆红素对氧化酶法测定甘油三脂浓度的影响分析［J］.安徽医学，2007，28（1）：69～71.

6 王卉妍.胆红素对酶法和碱性苦味酸法测定肌酐的影响［J］.医疗装备，2009，22（12）：39～40.

7 李庆禄，池洪治，张长庚，等.高胆红素对肿瘤相关物质群（TSGF）测定的干扰研究［J］.现代检验医学杂志，2005，20（4）：68～69.

8 郭华国，姚正国.脂质、血红蛋白、胆红素标本对乙肝病毒DNA荧光定量测定的影响［J］.微循环学杂志，2006，16（1）：32～33.

9 张碧玉，唐 宁，曹文静，等.纤维蛋白（原）降解产物定量检测方法的建立与评价［J］.微循环学杂志，2007，17（1）：46～48.

10 杨剑虹，王金湖.胆红素氧化酶法消除胆红素对酶法测定甘油三酯的干扰探讨［J］.齐齐哈尔医学院学报，2008，29（24）：3 021.

11 黄忠仕.高铁氰化钾法快速消除胆红素干扰血清肌酐测定的实验研究［J］.右江民族医学院学报，2002，24（3）：411～412.

12 吴教仁.胆红素对血清无机磷紫外光度测定法的负干扰与克服方法［J］.陕西医学检验，2000，15（4）：44.