何晓峰 章 引

我国是肝脏疾病大国，且肝硬化发病率日渐升高。腹水是肝硬化失代偿期患者最为显著的临床表现（占75%以上），可能出现自发性腹膜炎（SBP）或癌变。临床上通常采用手工法显微镜细胞学检查进行辅助诊断，但效率较低，结果的准确性和重复性也较差。新型Sysmex全血自动分析仪（XT4000i、XE5000）已配备体液模式和肿瘤细胞参数，具备强大的体液检测功能，但主要面向大型综合性医院，在很多基层医院未能购买使用。经典的Sysmex XS、XT系列全自动血液分析仪采用的检测原理在核心技术（半导体激光＋DNR、RNA染色＋流式细胞技术）上与新型的XT4000i等是相同的，因而也应该具备腹水标本检测和异常细胞提示功能。本文以Sysmex中低端仪器的代表XT－1800i全自动血液分析仪检测246例晚期肝硬化腹水标本的白细胞计数、分类及异常细胞，并与传统手工镜检对比，分析其相关性、一致性、灵敏度、特异性等，为临床诊断提供更多依据。

1 资料与方法

1.1 病例和标本采集

我院2009年12月～2011年11月收治的246例晚期肝硬化腹水患者。男204例，女42例，年龄28～65岁，病程5～20年。诊断标准参照《传染病学》［1］。腹水标本采集：由有经验的临床医师于患者入院次日按浆膜腔积液常规抽取方法采集腹水标本送检，为防止标本出现凝块、细胞变性、细菌破坏自溶等，应用EDTA－K2抗凝。每例患者取10ml等分成两个5ml，0.5～1h内分别完成手工法和仪器法检测。

1.2 仪器及试剂

XT－1800i全自动血液分析仪及配套试剂、质控品、校准品为日本Sysmex公司产品；Olympus显微镜（日本奥林巴斯光学工业株式会社）；瑞氏染液（珠海贝索生物技术有限公司）。

1.3 检测方法

仪器法按照Sysmex公司提供的标准操作流程，上机前确认无凝块，肉眼见浓稠度较高者进行适当稀释，于仪器界面直接读取白细胞计数和分类；异常细胞以仪器界面的科研参数为准，报警即为阳性。手工法操作参照《全国临床检验操作规程》［2］。

1.4 统计学处理

采用spearman相关检验评价仪器法与手工法对白细胞计数和分类的相关性；以手工法检测腹水异常细胞的结果为标准，计算仪器法的灵敏度、特异度、Youden指数、阳性预测值及阴性预测值；应用Kappa值（＞0.8为有良好一致性）进行两种方法的一致性评价。所有统计分析均采用SPSS13.0软件包。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 白细胞计数和分类

仪器法和手工法检测结果显示：两种方法对白细胞计数、中性粒细胞和淋巴／单核细胞分类的最小值、最大值、均值均非常接近呈显著正相关，相关系数均＞0.950（P＜0.05）。见表1。

2.2 两种方法检测腹水异常细胞的阳性率比较

在所有标本中，仪器法检测出18例阳性标本，阳性率7.32%，手工法进行细胞形态学确认10例为肿瘤细胞，阳性率4.07%，仪器法有2例漏检，占整体比例为0.81%，两种方法的Kappa值＝0.9512＞0.8，有极好的一致性。以手工镜检结果为准，仪器法检测异常细胞灵敏度为80.00%，特异度为99.12%，Youden指数为0.7912。本院晚期肝硬化癌变率为10%，计算其阳性预测值为91.01%，阴性预测值为97.80%。

表1 两种方法白细胞计数及分类结果的相关性分析（n＝246）

3 讨 论

胸腹水的白细胞计数及分类对临床相关疾病的诊断、治疗有较重要的意义。张勇等［3］研究指出，全自动血液分析仪完全适用于胸腹水细胞计数及分类检查，既可省去显微镜计数法的繁琐手续，又可以达到准确、快速的目的。本文结果显示仪器法和手工法检测肝硬化腹水患者白细胞计数和分类结果具有显著正相关性，与相关研究结果［3～5］一致。另外，仪器法检测结果对不同医院间可能具有更好的可比性，尤其对病程较长、需要转诊的肝硬化患者病情的动态观察更为有利。

对于全自动血液分析仪异常报警情况，王静等［6］报道全血检测时Blast与镜检相比准确率仅为33.3%，刘伯让等［7］报道全血检测时异常细胞假阳性率为3%，其原因可能与采血操作不当或临床因素使血细胞的大小、形态及内容物发生改变，致其产生的电阻抗、散射光及荧光信号不规则，仪器无法正确识别所造成。本文标本为腹水，白细胞计数范围为0.12～2.65×109／L，均值0.572×109／L，远低于血液中正常含量4.00～10.00×109／L，且成分相对单一，因此受影响较小，结果与镜检保持了良好的一致性。表明全自动血液分析仪对异常细胞，包括肿瘤细胞具有较好的提示作用。

本文仪器法和手工法检测的白细胞总数和分类数据均不符合正态性分布，因此均值以中位数表示。3个指标检测数据中均为手工法的低值低于仪器法，高值高于仪器法，表观区域更宽，可能系手工法人工误差较大，数据离散度更高所致。李莹等［8］亦提示血细胞分析仪计数胸腹水白细胞可能更加精确，更能排除操作人员视觉及操作的人为差异。

1 彭文伟 主编.传染病学［M］.北京：人民卫生出版社，2005：21～50.

2 中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程［M］.南京：东南大学出版社，2006：132～135.

3 张 勇，伍淑娴，余秀文.全自动五分类血液分析仪在胸腹水检测中的应用［J］.国际检验医学杂志，2010，10（31）：1 175～1 176.

4 谢 军.胸腹水细胞计数自动分析方法的探讨［J］.中国实用医学杂志，2009，19（1）：7.

5 胡晓卫，白 雯.自动化分析仪在胸腹水细胞计数及分类中的应用［J］.陕西医学杂志，2009，38（7）：928～929.

6 王 静，庄培英，蔡 姝.Sysmex XT－1800i血液分析仪白细胞分类异常报警的临床价值分析［J］.中国冶金工业医学杂志，2008，25（2）：231～232.

7 刘伯让，裴卫国，薛彩霞，等.SF－3000血细胞分析仪649例假异常结果的调查分析［J］.中国医院管理杂志，2009，7（6）：44.

8 李 莹，孙玉鸿，王英敏.UF－100尿液分析仪及血细胞分析仪在胸腹水白细胞计数中的对比性研究［J］.黑龙江医学科学，2010，33（1）：134～135.