金线莲挥发油成分的提取及其体外抗肿瘤作用研究*
2012-11-06陈新峰阙万才
陈 焰 ,陈新峰 ,阙万才 ,杨 菁
(1.福建省福清市第一医院药剂科,福建 福州 350300;2.福建医科大学附属协和医院药学部,福建 福州 350001)
金线莲主要分布在我国亚热带地区,其中以闽、浙、赣、台为主要产地,特别在台湾地区备受青睐,被称为“药中之王”[1]。目前,我国对该植物的研究主要集中在人工栽培、组培、药理等方面,而对其有效成分抗肿瘤作用的研究报道较少,限制了开发利用。本试验中,应用水蒸气蒸馏提取法对金线莲中的挥发油成分进行提取分析,并研究其体外抗肿瘤活性,现报道如下。
1 仪器与材料
气相色谱-质谱联用仪(6890N网络气相色谱体系构建),5975B InertxlMSD,进样系统为7683B系列,均来自美国安捷伦公司;LC-2010C型高效液相色谱仪(日本岛津);酶标仪450(美国Bio-Rad公司)。福建组培金线莲鲜草(购自福建医科大学附属协和医院中药房);四甲基偶氮唑盐(MTT,西格玛公司),RPMI 1640培养基(胎牛血清,批号为NVL0338);人肺癌细胞NCI-H446细胞,由福建医科大学附属协和医院血液学研究所提供。
2 方法与结果
2.1 水蒸汽蒸馏法提取金线莲挥发油
将新鲜的金线莲用剪刀剪成约0.5 cm长的小段,精密称取50 g,加适量水溶解,浸泡 24 h,用挥发油提取器提取 15 h,得到黄色的挥发油30 mg,加乙醚溶解并定容到2 mL容量瓶。挥发油提取率为0.06%。
2.2 色谱条件[2]
气相色谱:色谱柱为DB-35MS石英毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm,0.25μm);载气为氦气,流速为1.0 mL/min;分流进样比为5∶1;进样量为1μL;升温程序为45℃保持7 min,以6℃ /min升温到120℃(保持2min),再以3℃ /min升温到280℃,共计74min;进样口温度为250℃。
质谱:离子源为EI源;电子轰击电压70eV;离子源温度为230℃;四极杆温度为 150℃;传辅线温度为280℃;溶剂延迟4.0 min;质量扫描方式为全扫描(SCAN);扫描范围1.6~500 amu;NIST107标准质谱检索库。……
