彭 博，臧圣奇，刘敏杰，马志伟，王新文，刘玲侠，王勤涛

(第四军医大学口腔医学院，陕西西安 710032)

牙周病是危害人类口腔和全身健康的主要口腔疾病，其所导致牙周支持组织丧失，是成年人牙齿丧失的主要原因之一。牙周治疗的目标不仅是控制炎症，更在于使已破坏的牙周组织再生以形成新附着。传统的牙周治疗和引导组织再生技术虽取得一定的临床效果，但尚不能达到上述目的。随着组织工程技术的发展，为牙周病的治疗开辟了新的思路和方法，而具有良好生物性能的支架材料一直是组织工程学研究的重点。

壳聚糖温敏凝胶是一种天然来源的聚阳离子生物聚合体，由于其来源广泛，且具有无毒性［1］、良好的生物相容性［2］和可降解性［3－4］、抗菌活性［5］、粘附性［6］以及促进组织再生等良好性能［7］，已作为药物缓释系统［8］和支架材料［9］在医学、生物学领域得到了深入的研究和广泛的应用。

然而，传统的消毒方法会导致壳聚糖凝胶的物理性能不稳定，从而限制了在牙周组织工程中的应用，本研究通过改变壳聚糖的消毒方法，检测其凝胶化时间和粘度，并观察人牙周膜细胞在凝胶表面和凝胶浸提液中增殖情况，为其能作为更稳定的牙周组织工程支架材料提供实验室依据。

1 材料和方法

1.1 主要材料和仪器

壳聚糖(448877，DD≥85%，sigma公司，美国);β－甘油磷酸钠(β－GP;医药级，Merck公司，德国);α－MEM 培养基(Hyclone，美国);胎牛血清(北京赛默飞世尔生物化学制品有限公司);电子天平(JY2002，上海良平仪表);0.22 μm 除菌滤器、酶标仪(TECAN sunrise，奥地利);倒置荧光显微镜(Leica DM6000B，德国 )。……