杜晓旭，钟 洁，段玉峰，邹柯婷，杨 闻

(陕西师范大学食品工程与营养科学学院，陕西西安710062)

蒲公英糖蛋白的分离纯化及结构分析

杜晓旭，钟 洁，段玉峰*，邹柯婷，杨 闻

(陕西师范大学食品工程与营养科学学院，陕西西安710062)

通过DEAE－52纤维素柱层析和Sephadex G－100葡聚糖凝胶层析手段分离纯化，从蒲公英中分离纯化得到三种蒲公英糖蛋白(TMGP)－a、b、c，采用薄层层析法对其纯度进行鉴定，结果显示三种成分均为均一组分。经分析，蒲公英糖蛋白粗品TMGP和均一品TMGP－a、TMGP－b、TMGP－c中多糖的含量为79.12%、71.23%、70.25%、74.35%;蛋白质的含量为:13.35%、19.79%、20.78%、17.60%。β－消除反应说明三种蒲公英糖蛋白均一品都含有O－连接型糖蛋白。经红外光谱分析，TMGP－a糖蛋白可能含有少量硫酸基;TMGP－b糖链中可能是硫酸化多糖;TMGP－c含有吡喃糖β－糖苷键。

蒲公英，糖蛋白，分离，纯化，结构分析

蒲公英糖蛋白粗制品 实验室自制;DEAE－52纤维素、SephadexG－100 英国Whatman产品;葡萄糖、正丁醇、95%乙醇、无水乙醇、丙酮、氯仿、苯酚、乙醚、氢氧化钠、双氧水、硫酸等 均为国产分析纯。

DBS－100型电脑全自动部分收集器、DHL－A型电脑恒流泵 上海沪西分析仪器厂;RE－52AA型旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂;800B型离心机上海安亭科学仪器厂;微量移液器 日本NICHIRYO公司;半微量凯氏定氮蒸馏装置 上海贝特仪电设备厂;T6型紫外可见分光光度计 北京普析通用仪器有限公司;EQUINX55型傅立叶变换红外光谱仪德国Brucher公司;层析柱(2.6cm×80cm和1.5cm× 50cm) 北京昌阳永川实验器材销售中心。

1.2 实验方法

1.2.1 蒲公英糖蛋白粗品纯化［5－6］取蒲公英糖蛋白粗品0.5g，用10mL蒸馏水完全溶解，上DEAE－52纤维素柱(2.6cm×80cm)，洗脱速度为0.5mL/min，依次用0.1、0.2、0.3、0.5mol/L的NaCl溶液洗脱，用部分收集器收集，每管收集10mL。……