仲月明，张传丽，陈 鹏，*，沈丹红，吴秋月，周长远

(1.扬州大学园艺与植物保护学院，江苏扬州225009; 2.扬州大学生物科学与技术学院，江苏扬州225009)

银杏类黄酮O-甲基转移酶活性的高效液相色谱分析

仲月明1，张传丽2，陈 鹏1，*，沈丹红1，吴秋月1，周长远1

(1.扬州大学园艺与植物保护学院，江苏扬州225009; 2.扬州大学生物科学与技术学院，江苏扬州225009)

首次明确了银杏叶片类黄酮生物代谢关键酶O－甲基转移酶(flavonoid O－methyltransferase，FOMT)活性的HPLC测定技术与方法。采集扬州大学银杏种质资源圃银杏雄株成熟叶片，提取粗酶液，根据FOMT催化反应生成S－腺苷－L－高半胱氨酸(SAH)的原理，以山奈酚、槲皮素和异鼠李素等3种黄酮苷元为反应底物，采用优化的HPLC体系检测样品中FOMT催化反应生成的SAH峰面积，通过标准曲线求得不同反应底物的FOMT相对活性。FOMT活性反应生成物SAH在1.5～20μg/mL内呈良好的线性关系，RSD为2.1%(n=5)，建立了FOMT活性测定优化体系。不同反应底物的FOMT活性表现不同，山奈酚与异鼠李素显著高于槲皮素。FOMT活性HPLC测定方法准确、快速、可靠、灵敏度高。

银杏，雄株，叶片，类黄酮O－甲基转移酶(FOMT)活性，高效液相色谱

银杏(Ginkgo biloba L.)素有“活化石”之称，集食用、保健、药用、生态和观赏等价值于一体。其叶片已得到规模化开发利用并发展成为集约化、标准化经营的国际性重大产业［1－3］。银杏叶中类黄酮是次生代谢产物，是银杏叶的主要功能性成分。其主要包括单黄酮、双黄酮和儿茶素等3类。其中具有生物活性的单黄酮类化合物主要由山奈酚(kaempferol)、槲皮素(quercetin)和异鼠李素(isorhamnetin)等黄酮苷元及其与有关糖类结合而成的糖苷组成(图1)。……