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荧光PCR快速检测A、C、G群溶血性链球菌

2012-11-02兰全学祝仁发杨国武

食品工业科技 2012年8期
关键词:实验检测

林 霖,兰全学,祝仁发,2,杨国武,*

(1.深圳市计量质量检测研究院,广东深圳518131; 2.佛山市农业局,广东佛山528000)

荧光PCR快速检测A、C、G群溶血性链球菌

林 霖1,兰全学1,祝仁发1,2,杨国武1,*

(1.深圳市计量质量检测研究院,广东深圳518131; 2.佛山市农业局,广东佛山528000)

克服现有文献中PCR检测方法仅能检测兰氏A群链球菌的局限,建立适用于溶血性链球菌群全族群的荧光PCR快速检测方法,实现与国家标准GB/T 4789.11-2003检测范围一致。通过文献搜索以及杆菌肽敏感实验,对国标检验范围进行界定。使用CLUSTAL X软件寻找兰氏A、C、G群保守序列并设计特异性引物和探针,同时通过特异性实验、模拟污染实验以及方法比对实验验证该方法的特异性、检出限及可靠性。特异性实验结果表明,该方法能特异扩增兰氏A、C、G群链球菌;模拟污染实验表明,在增菌18h后增菌液最低初始污染菌含量分别为3、50、2CFU/mL时,兰氏A、C、G群链球菌可被检出。110份样品比对实验结果表明与国标检测方法实验结果一致。该方法可应用于食品中溶血性链球菌的快速检测,并可为快速检测溶血性链球菌国家标准的建立提供参考。

实时荧光PCR,溶血性链球菌,检测,食品

近年来食品安全问题已成为公众关注的焦点问题,而微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中最为突出的问题。溶血性链球菌属于链球菌属,其广泛存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中,可通过直接接触、空气飞沫或皮肤、粘膜伤口感染传播,而被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会使人类感染[1]。……

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