赵 静，黄光荣，蒋家新

（中国计量学院生命科学学院，浙江杭州310018）

响应面优化虾头壳酶促水解清除DPPH自由基活性的研究

赵 静，黄光荣*，蒋家新

（中国计量学院生命科学学院，浙江杭州310018）

以碱性蛋白酶水解虾头壳蛋白质，在影响水解条件单因素研究基础上，采用响应面方法中心组合设计，建立以DPPH自由基清除率为指标的水解模型，优化得出最佳酶解条件，并测定水解液中多肽的相对分子质量分布。结果表明，最佳酶解条件为pH7.2、温度50.5℃、加酶量415U/g、时间120min。在此条件下水解，水解度达21.8%，DPPH自由基清除率为66.9%，平均肽段长度为4.6，酶解液中大部分肽的相对分子量低于6500u。

虾头，碱性蛋白酶，响应面分析，DPPH自由基清除率，水解度

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

虾头壳 购于浙江温州水产品市场，样品经晒干后100℃烘干再机械粉碎后过100目筛，4℃密闭下保存备用；碱性蛋白酶（2×105U/g） 上海楷洋生物技术有限公司；DPPH（二苯代苦味肼基自由基） 上海百灵威化学技术有限公司；分子量标准品维生素B12（Mr1335） 上海伯奥生物科技有限公司；抑肽酶（Mr6500）、细胞色素C（Mr14400，纯度97%） 美国Sigma公司；牛血清白蛋白（Mr66700） 华美生物工程公司；其余化学试剂 均为分析纯。

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