刘 琪，江连洲，2，*，李 扬，2，王 梅，王胜男，齐宝坤

（1.东北农业大学食品学院，黑龙江哈尔滨150030；2.国家大豆工程技术研究中心，黑龙江哈尔滨150030）

Protex 6L直接酶解红豆粉提取红豆肽的研究

刘 琪1，江连洲1，2，*，李 扬1，2，王 梅1，王胜男1，齐宝坤1

（1.东北农业大学食品学院，黑龙江哈尔滨150030；2.国家大豆工程技术研究中心，黑龙江哈尔滨150030）

采用Protex 6L直接酶解红豆粉的方法提取红豆肽，通过响应曲面分析得出Protex 6L蛋白酶提取红豆蛋白的最佳条件：pH为9.4，加酶量为3.14%，温度为60℃，时间为3.5h，料液比为1∶6.9（g/mL）。并采用凝胶层析过滤色谱分析了不同水解时间水解物分子量的变化，发现红豆蛋白中存在一些不容易被Protex 6L酶解的成分，红豆粉的Protex 6L酶解过程是一个不均匀的过程。

Protex 6L，酶解，红豆肽，响应面法

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

红豆 市售，粉碎后过80目筛，蛋白质20.7%、灰分3.3%、脂肪0.5%、碳水化合物58%、水分4.8%；Protex 6L（活力1.0×105U/mL） 丹麦Novo公司；Sephadex G-75 Fine Amersham Pharmacia Biotech公司；Bacitracin、Enkephalin、Angiotensin Sigma公司；牛血清白蛋白 海伯奥生物科技有限公司。

Z12-S9粉碎机 上海精科实业有限公司；LD4-2A离心机 北京医用离心机厂；JJ-1精密电动搅拌机 江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司；ALC310.3电子分析天平 北京赛多利仪器有限公司；pHS-25型酸度计 上海伟业仪器厂；DZKW-8-4电热恒温水浴锅 余姚市东方电工仪器厂；HYP消化炉、KDN-04B半自动定氮仪 上海纤检仪器有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 实验流程 红豆→除杂→研磨→水分调节→粉碎60目过筛→调节温度和pH→加酶水解→灭菌→离心分离→上清液加入等体积TCA→离心分离→上清液定氮

1.2.2 红豆肽的酶解工艺[9]采用单因素实验对加酶量、酶解温度、酶解时间、料液比和酶解pH5个因素进行研究，确定各因素的最佳水平值范围，再采用响应面中心组合实验设计，研究各酶解参数对考察指标的影响规律。……