大黄素对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用
2012-11-02秦春妮黑飞龙王世磊陈蒙蒙
秦春妮,黑飞龙,吴 蓓,王世磊,陈蒙蒙,龙 村
大黄素的化学名称为1,3,8-三羟基-6-甲基蒽醌,主要来源于蓼科植物掌叶大黄根茎,是中药大黄的主要有效单体之一。现代药理学研究表明大黄素有抗菌消炎、抗肿瘤、免疫抑制、抗病毒、保护肝肾、改善微循环等作用[1]。本研究采用大鼠肠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)模型,了解大黄素对肠I/R损伤的保护作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物 选用清洁级雄性SD大鼠36只,由阜外心血管病医院动物实验中心提供,适应性喂养5天后用于实验,实验前12 h禁食,术前4 h禁饮。
1.2 药品与试剂 大黄素化学对照品购于中国药品生物制品检定所(批号110756-200110);大鼠TNF-α、内毒素、IFABP酶联免疫试剂盒由美国RD公司提供;羧甲基纤维素钠由北京索莱宝科技有限公司提供。
1.3 仪器 全自动多功能酶标仪,电热恒温培养箱,半自动洗板机,减压干燥箱,低温离心机,-70℃低温冰箱。
1.4 动物模型制备与分组 将36只SD大鼠随机分为3组,每组12只,分为假手术组(A组),缺血再灌注组(B组)和大黄素灌胃预处理组(C组)。用质量分数为10%的水合氯醛(3 ml/kg)腹腔注射麻醉大鼠,上腹部正中切口入腹,钝性分离肠系膜上动脉(superiormesenteric artery,SMA)根部,A组术前2 h给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液按10 ml/kg灌胃,只分离SMA,然后缝合腹部伤口,B组术前及术中处理同A组,分离SMA,用无创动脉夹夹闭SMA根部,待确定SMA血流被完全阻断后(肠壁色泽灰白,系膜血管无搏动),缝合伤口,夹闭1 h后松开动脉夹,恢复SMA血流灌注1 h。C组给予大鼠浓度为20 mg/kg的大黄素灌胃,手术操作同B组。
1.5 标本采集与处理 在灌胃前和缺血1 h时各取股静脉血1 ml,再灌注1 h后取下腔静脉血1 ml,A组在对应各时点取血。……
