张永勤，王 斐，曾凡伟，王哲平，张 杰，赵 鑫，程 千

(青岛科技大学化工学院，山东 青岛 266042)

微量测定木聚糖酶活力的新方法
——MBTH法

张永勤，王 斐，曾凡伟，王哲平，张 杰，赵 鑫，程 千

(青岛科技大学化工学院，山东 青岛 266042)

建立一种木聚糖酶活力的微量测定新方法——3-甲基-2-苯并噻唑酮腙(MBTH)法。根据木聚糖及其酶解产物的特殊性，研究MBTH法的显色条件，并以多点测定法对酶活力测定中的几个关键参数进行探讨。结果表明：蛋白质在其质量浓度低于30μg/mL时对测定无干扰；木聚糖溶液的最佳测定质量浓度为4mg/mL；较高的酶解温度会使木聚糖酶在测定过程中失活，因此，酶活力测定的最佳温度为30℃，而远低于该酶的最适温度；酶解时间为60min以内；酶解产物与MBTH试剂的反应时间应控制在13～16min之间，以15min为最佳。以酶解时间为30min计，本法检测限为0.135mU/mL，定量限为0.451mU/mL，适当延长酶解时间可相应提高酶活力检测灵敏度。该法准确度高，结果稳定，灵敏度远高于DNS法。

木聚糖酶；M B T H；活力；木聚糖；木糖；测定

木聚糖是一种多聚五碳糖，是植物半纤维素的重要组成成分，是自然界中继纤维素之后含量第二丰富的可再生资源。木聚糖酶是一类降解木聚糖分子中β-1,4木糖苷键的酶系，是可将木聚糖水解为低聚木糖、木寡糖、木二糖以及少量阿拉伯糖和木糖的一种复杂的复合酶系统[1]，因而广泛应用于生物能源、食品、饲料、制药、制浆、造纸、纺织等行业中，已成为国内外众多学者的研究热点[2-5]。

酶活力是衡量酶生物活性的重要指标，也是控制木聚糖酶制剂产品质量的关键参数。……