那治国，马永强*，韩春然，石彦国

(1.黑龙江东方学院食品与环境工程学部，黑龙江 哈尔滨 150086；

2.哈尔滨商业大学食品工程学院，黑龙江 哈尔滨 150076)

高去酰胺蛋白酶产生菌的诱变选育及产酶条件优化

那治国1，马永强2,*，韩春然2，石彦国2

(1.黑龙江东方学院食品与环境工程学部，黑龙江 哈尔滨 150086；

2.哈尔滨商业大学食品工程学院，黑龙江 哈尔滨 150076)

以地衣芽孢杆菌2709为出发菌株，采用氮离子注入技术，在最佳注入剂量为1.5×1015ions/cm2的条件下进行诱变处理，筛选得到一株去酰胺度高达48.99%的突变株SDL-9，去酰胺度提高了85.57%，而肽键水解度相对较弱。并对SDL-9的产酶条件进行优化，结果表明：最佳碳源为质量浓度为2.0g/100mL的玉米粉，最佳氮源为质量浓度3.0g/100mL的大豆蛋白，质量浓度为0.04g/100mL Fe3+对产酶具有明显的促进作用，质量浓度为0.9g/100mL谷氨酰胺对产酶有明显的诱导作用，最佳起始pH值为7.0，最佳发酵温度35℃，在此条件下进行发酵产酶，测得去酰胺度为57.1%，肽键水解度为13.2%。

氮离子注入；去酰胺；碱性蛋白酶

离子注入技术是20世纪80年代兴起的一种材料表面处理技术。1986年中国科学院等离子体物理所余增亮发现N+离子注入水稻种子的诱变作用，证实了质量(粒子)沉积生物效应的存在，开辟了低能离子与物质相互作用这一新的研究方向[1-2]，是育种方法学的重要创新并从国内走向世界。它与传统的诱变源如X射线、γ射线、UV射线以及化学诱变剂相比，离子注入除有能量沉积外，还有动量传递、质量沉积及电荷交换等效应[3-4]，所以离子束注入技术是一种集理化诱变因子于一体的综合技术方法，具有高效、高定向性、损伤轻、突变谱广的特点[5-6]。……