路 梅，叶美娟，凌丹燕，陈文荣

(浙江师范大学化学与生命科学学院，浙江 金华 321004)

茶花炭疽病是茶花主要病害之一，由胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起，病症多出现于叶缘、叶尖和叶脉两侧。初现暗绿色斑纹，后逐渐扩大成不规则大斑，颜色由褐色变为黑色，严重时可扩散到整个叶片，引起大量落叶。该病害在浙江省金华地区普遍发生，严重影响茶花的观赏和经济价值。胶孢炭疽菌可以引起百余种植物发生炭疽病，主要危害叶片和果实，国内外每年都有很多相关研究报道［1-2］，然而，对茶花炭疽病的研究却鲜有报道。关于该病菌的侵染过程，目前研究一致认为，胶孢炭疽菌的分生孢子先附着于寄主表面，条件适合，产生芽管，继而在其顶端形成附着胞，随后侵入寄主表皮细胞［1］。因此，分生孢子萌发率和附着胞形成率的高低成为病原菌侵染寄主成功与否的关键。本文将报道实验室内影响茶花炭疽菌孢子萌发和附着胞形成的主要因子，为进一步阐明病害的发生规律和制定有效的防治措施提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

茶花炭疽病菌株(C.gloeosporioides)由浙江师范大学分子生物学实验室提供。

1.2 方法

将菌种接种于PDA培养基中，置于25℃生化培养箱中培养5 d，产孢备用。采用“载玻片法”进行孢子的萌发［3］。具体方法如下:在直径9 cm的培养皿内放置1层滤纸，吸取无菌水将滤纸浸湿，上面放2根玻璃棒，载玻片架在玻璃棒上;将200 μL各种溶液配制的孢子悬浮液(1×105～1×106个/mL)滴在载玻片上，于25℃培养箱中培养;分别在8、12、24 h后取出观察，计算孢子萌发率和附着胞形成率(孢子萌发率=已萌发的孢子数/总孢子数;附着胞百分率=附着胞数/孢子萌发数)［1］。……