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碱性果胶酶基因在毕赤酵母中的非诱导表达

2012-10-25张爱平蔡少丽郑海英柯崇榕黄建忠

微生物学杂志 2012年6期

张爱平,蔡少丽,杨 鹤,郑海英,柯崇榕,黄建忠

(福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心生命科学学院福建省现代发酵技术工程研究中心,福建 福州 350108)

果胶酶(pectinases)是一类含多种酶的复合酶,可用于植物纤维中果胶质(由D-半乳糖醛酸以α-1,4-糖苷键连接形成的直链状的聚合物)的分解。已广泛应用于传统工业加工过程中,如果胶提取、酒类澄清、咖啡和茶的发酵、油的提取、污染果胶的污水处理等[1-2]。果胶酶可按照作用底物(果胶酸、果胶酯和原果胶等)、作用方式(裂解和水解)、作用位点(内切和外切)、作用适宜pH(酸性、中性和碱性)进行分类。碱性果胶酯裂解酶(EC 4.2.2.2.)是指可在碱性条件下水解聚乳糖醛酸α-1,4-糖苷键并释放出可溶性不饱和寡聚乳糖醛酸的一类碱性果胶酶,一般多指聚半乳糖醛酸裂解酶(polygalacturonate lyase,PGL)[3]。碱性果胶酶除广泛应用于食品(茶叶和咖啡发酵、榨油、诱导植物抗病的绿色食品生产)、环境保护(废水处理)、植物病毒纯化、饲料添加剂、洗涤剂以及纸浆漂白等方面,已成为绵织物处理过程中至关重要的生物制剂[4-5]。与传统的处理棉织纤维的工艺相比,在工艺上和处理效果上都有许多优势。碱性果胶酶主要来源于细菌,早期主要进行野生菌种筛选及酶学特性方面的研究[6],直至20世纪80年代后才渐渐有将其基因克隆进行异源表达的研究,但都主要集中在大肠埃希菌中表达,产量低,并且需要昂贵的IPTG作为诱导剂,并不太可能用于工业化生产[7-8]。于是近年来越来越多将其异源表达的研究转向了技术成熟并利于工业化生产的毕赤酵母。……

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