储菲菲，沐万孟，邢庆超，周榴明，张 涛，江 波，*

（1.江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡 214122;2.罗盖特美国公司，基奥卡克52632，美国)

Clostridium bolteae ATCC BAA-613 D-塔格糖3-差向异构酶的诱导表达、纯化及活性研究

储菲菲1，沐万孟1，邢庆超1，周榴明2，张 涛1，江 波1，*

（1.江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡 214122;2.罗盖特美国公司，基奥卡克52632，美国)

D-塔格糖3-差向异构酶是生物法生产新型功能性因子D-阿洛酮糖最为有效的酶。一种新型的能够编码D-塔格糖3-差向异构酶的基因CLOBOL_00069被克隆，它来源于Clostridium bolteae ATCC BAA-613。以pUC57为克隆载体，以pET-22b（+)为载体质粒，E.coli BL21（DE3)为宿主细胞，构建了基因重组工程菌。IPTG诱导剂诱导目的蛋白的表达;通过镍柱亲和层析，杂蛋白与目的蛋白得到了很好的分离。对纯化的重组蛋白样品进行SDS-PAGE分析，在约32ku处出现明显的特征条带。通过活性研究表明，Clostridium bolteae ATCC BAA-613 DTEase属于DTEase家族，并具有较高的生物转化率，反应10h后转化率达到20%。

D-塔格糖3-差向异构酶，D-阿洛酮糖，基因重组，亲和层析

D-阿洛酮糖是一种在自然界中较为稀有的天然己酮糖，属于稀有糖的一种，是D-果糖的差向异构体。D-阿洛酮糖是近年发现的一种具有特殊保健功能的新型功能性因子，它的热量值只有0.007kcal/g[1];具有降低血糖的生理功能[2]和可抑制肝脏脂肪合成酶活性，减少脂肪沉积的作用[3];体外实验发现它具有神经保护作用，可抑制6-羟基多巴胺诱导的小鼠嗜铬细胞瘤细胞凋亡[4];与D-葡萄糖和D-果糖相比，具有较强的清除活性氧的能力[5]。所以，由于其优良的功能性质而受到人们的广泛关注，具有巨大的市场前景。……