高碘酸钠氧化法固定化磷脂酶A1的研究
2012-10-24于殿宇张佳宁
于殿宇,马 莺,刘 晶,张佳宁,李 琳
(1.哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,黑龙江哈尔滨 150090;2.东北农业大学食品学院,黑龙江哈尔滨 150030)
高碘酸钠氧化法固定化磷脂酶A1的研究
于殿宇1,2,马 莺1,*,刘 晶2,张佳宁2,李 琳1
(1.哈尔滨工业大学食品科学与工程学院,黑龙江哈尔滨 150090;2.东北农业大学食品学院,黑龙江哈尔滨 150030)
研究了高碘酸钠氧化法在纤维素滤纸膜载体上固定化磷脂酶A1的最佳条件。结果表明,以固定化酶活力为指标,当高碘酸钠浓度为0.15mol/L,活化80min,与浓度为0.05g/mL酶的磷酸盐缓冲溶液(pH为5.8)于戊二醛浓度0.4%、温度4℃交联4h,获得的固定化磷脂酶A1酶活最高为4.8U/cm2。固定化酶膜的酶学性质为:最适温度35℃;最适pH为9.0。与游离酶相比,pH向碱性偏移1.0;经7次重复使用后,固定化酶膜活力为原酶活的65%以上。SEM结果显示,经高碘酸钠氧化后的纤维素滤纸膜能较好地固定磷脂酶A1。
磷脂酶A1,高碘酸钠氧化法,固定化,纤维素滤纸膜,酶活
磷脂酶A1是一类可以水解磷脂Sn-1位酯键获得2-酰基-溶血磷脂和脂肪酸的酶,广泛存在于动植物和微生物中[1]。游离磷脂酶A1价格昂贵,不易回收,催化水解时条件苛刻。磷脂酶A1不仅具有脂肪酶活性,而且还同时具有磷脂酶活性,但是在一定的反应体系中,会优先表现出一种特定的酶活,价格低廉的磷脂酶A1在工业上具有巨大的应用价值[2]。最早将酶法脱胶用于大工业生产的是德国Lurgi公司,称为“EnzyMax process”,国内也进行了相关的研究,当时采用的是一种猪胰脏来源的磷脂酶A2,由于该酶必须以Ca2+为激活剂,且来源有限,价格昂贵,而且在脱胶效果上尚存在一些不足,该方法一直未进行大规模推广。……
