余 涛，李良庆，王家兴，于锡阳，栗大伟

(福建医科大学附属第一医院胃肠外科一区，福建福州350004)

胃癌是世界上最常见的消化道恶性肿瘤之一，尤其是在东亚和东南亚，包括中国在内［1］。每年我国因胃癌死亡的人数占各种恶性肿瘤之首，传统手术及术后化疗对进展期胃癌的治疗仍不理想，近年来，随着对肿瘤分子生物学研究的不断深入，针对肿瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期等的研究逐渐成为抗肿瘤治疗的重点和热点。环氧合酶－2(cyclooxygenase-2，COX-2)作为新型肿瘤标志物，在多种人类肿瘤中过度表达，在肿瘤的进展中，COX-2参与了许多病理生理过程，包括细胞的增殖、凋亡、调节免疫和血管生成［2－3］。近年来选择性COX-2抑制剂，在抗肿瘤通路中受到国内外学者的广泛关注，本实验通过MTT、免疫组化、ELISA、流式细胞仪观察选择性COX-2抑制剂NS-398在体外对胃癌细胞增殖、凋亡的影响。

1 材料和方法

1.1 主要材料及试剂 人胃癌SGC-7901细胞株购自南京凯基生物技术有限公司。NS-398购自美国Sigma公司;四甲基偶氮唑蓝(MTT)购自美国Sigma公司;胰蛋白酶、RMPI-1640培养基、胎牛血清购自美国Gibco公司;前列腺素－E2(prostaglandin E2，PGE2)酶联免疫测定试剂购自江苏碧云天生物技术研究所;Alexa Fluor 488Annxin V/PI试剂盒购自Invitrogen公司。COX-2免疫组织化学试剂盒购自北京中杉金桥生物公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 SGC-7901细胞置于37℃，体积分数5%CO2恒温培养箱内培养，培养液为含体积分数10%灭活胎牛血清的RMPI-1640培养基，当细胞呈对数增殖并覆盖培养瓶瓶底80%面积时可用于传代或实验。

1.2.2 MTT法测定NS-398对SGC-7901细胞的抑制率 取对数期生长的SGC-7901细胞，制备单细胞悬液，以每孔1.0×104个细胞接种于96孔板培养24 h后。……