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人鼻咽癌细胞株中表皮生长因子受体蛋白表达与西妥昔单抗抑制率的相关性研究

2012-10-05刘静王斌斌刘斐叶左强

中国临床医学 2012年6期
关键词:水平检测

刘静 王斌斌 刘斐叶 左强

(南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东 广州 510515)

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因定位于染色体7p12[1]。EGFR在人类部分肿瘤中呈高表达,其介导的信号传导与肿瘤发生、发展及预后密切相关。鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中EGFR高表达,并且这种高表达与不良预后相关[2]。西妥昔单抗(cetuximab)是一种人/鼠嵌合型IgG单克隆抗体,可与细胞表面EGFR特异性结合,竞争性阻断表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和其他配体如转化生长因子-α(transforming growth factor-α,TGF-α)的结合,从而阻断EGFR依赖的肿瘤细胞增殖、转移、侵袭以及血管生成等生物学效应。本研究应用蛋白质印迹法检测人NPC细胞株CNE-1、CNE-2、HONE-1、C-666、SUNE-1、5-8F 以 及HNE-17种细胞株中EGFR蛋白表达水平,用MTT法检测西妥昔单抗对细胞株的抑制率,并探讨两者的相关性,了解检测EGFR蛋白表达水平是否能够判断西妥昔单抗治疗NPC的疗效。

1 资料与方法

1.1 研究材料 西妥昔单抗由德国Merck公司提供,β-actin一抗与EGFR一抗购自武汉Boster公司,人NPC细胞株CNE-1、CNE-2、HONE-1、C-666、SUNE-1、5-8F以及 HNE-1由广州博川生物科技有限公司提供。采用RPMI 1640培养液。

1.2 蛋白质印迹法检测EGFR蛋白表达水平 按常规方法进行。

1.3 MTT法检测细胞抑制率 按常规方法进行。用Bio-Tek酶标仪分析490 nm处OD值。细胞抑制率=(加药组OD值-空白对照组OD值)/(正常对照组OD值-空白对照组OD值)×100%

1.4 统计学处理 用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析。采用方差分析和双变量相关分析,检验水准α=0.05。

2 结 果

2.1 不同NPC细胞株中EGFR蛋白的表达差异不同NPC细胞株的EGFR表达水平有显著差异(F=1748.784,P<0.001),其中以5-8F细胞株中EGFR表达水平最高,显著高于其他6种细胞株(P<0.001);其次为SUNE-1,见图1~2。

图1 不同NPC细胞株EGFR蛋白表达

图2 不同……

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