胃癌组织中HERG的表达及其临床意义
2012-10-05邵晓冬张永国陈江林浩郭晓钟
邵晓冬 张永国 陈江 林浩 郭晓钟
(沈阳军区总医院消化内科,辽宁 沈阳 110016)
新近的研究[1]提示,某些钾离子通道(voltagegated potassium channels,KV)与恶性肿瘤的发生发展有关,其中电压门控钾离子通道与肿瘤的关系已成为研究的热点。人类eag相关基因(human ether-a-go-go-related gene,HERG)编 码 的 HERG蛋白是延迟整流型钾离子通道的α亚单位。国外已有研究[2]发现,HERG蛋白在多种肿瘤细胞中呈高表达。本研究旨在探讨HERG蛋白在胃癌组织中的表达水平及其临床意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料 收集沈阳军区总医院2000年—2002年经手术切除的45例原发性胃癌的组织标本及相应的癌旁正常胃组织(距离胃癌组织手术切缘>5 cm的胃组织)。45例患者中,男性26例,女性19例;年龄42~75岁;其中高分化腺癌13例,中分化腺癌14例,低分化腺癌18例;根据胃癌Borrmann大体分型:0型1例,Ⅰ型7例,Ⅱ型16例,Ⅲ型15例,Ⅳ型6例;26例患者有局部淋巴结浸润,所有患者的肿瘤均无远处器官的转移;根据国际抗癌联盟TNM标准分期:Ⅰ期4例,Ⅱ期14例,Ⅲ期20例,Ⅳ期7例。
1.2 免疫组化染色(SP染色法) 所有标本在10%多聚甲醛溶液中固定,脱水后以石蜡包埋、切片备用。组织切片经二甲苯脱蜡及梯度乙醇脱水;然后将切片置于3%过氧化氢室温放置20 min;切片表面加10%正常兔血清封闭液后将其置于湿盒中,37°C放置20min;按1∶200在切片表面滴加羊抗人HERG多克隆抗体,然后置于湿盒中,4℃过夜;加生物素标记的兔抗羊IgG,置于湿盒中,37℃放置30 min;滴加SP工作液,置于湿盒中,37℃放置30 min;3,3-四盐酸二氨基联苯胺(DAB)显色,用自来水反复冲洗终止反应;苏木精衬染;梯度乙醇及二甲苯透明并封片。
1.3 组织染色结果判定 显微镜下观察组织染色结果,分别根据染色强度和阳性细胞数比率对组织染色赋值。……
