吴寒 袁岱岳 贾晓斌 钱飞 朱建伟

（1.南通大学附属医院普外科，江苏 南通 226001；2.江苏省南通市第一人民医院普外科，江苏 南通 226001）

侵袭伪足（invadopodia）的形成是癌细胞发生侵袭转移的至关重要的条件之一，该过程有赖于皮层肌动蛋白（cortactin）的装配作用。作为侵袭性伪足形成的重要调控者，Arp2／3 复合物 （Arp2／3 complex）的主要作用是促进肌动蛋白的聚合和延长，这是肌动蛋白装配过程的主要限速步骤。虽然Wiskott-Aldrich综合征蛋白（Wiskott-Aldrich Syn-drome protein，WASPs）是Arp2／3复合物最强的激活蛋白，但是cortactin亦可通过加强Arp2／3复合体和肌动蛋白母链结合的关键步骤，促进Arp2／3复合物介导的分支肌动蛋白的成核。

cortactin有4个主要的功能区，其中与Arp2／3复合物结合的氨基末端酸性区域（NTA）和与肌动蛋白结合的一段串联的重复序列区域（ABR）需同时存在，才能参与Arp2／3复合物介导的分支肌动蛋白的装配[1－2]。我们的前期研究已成功设计仅包含ABR但无NTA的重组cortactin质粒[3]。本研究将仅包含ABR的重组质粒，命名为EGFP／N2／ABR，将其转染高侵袭性人大肠癌细胞株LoVo，期望通过靶向抑制肌动蛋白装配而控制其所依赖的肿瘤细胞膜活动，抑制肿瘤细胞的侵袭和转移，同时观察半乳糖凝集素（galectin-1）表达的变化。

1 资料与方法

1.1 材料 4～6周龄BALB／C裸小鼠36只，雌性，体质量（18.0±2.0）g，购自中科院上海实验动物中心。人大肠癌细胞株LoVo购自中科院上海细胞所。大肠杆菌DH5α由实验室自备。仅包含ABR的重组cortactin质粒由本课题组前期构建[3]。galectin-1抗体购自美国R＆D公司。Taq酶、限制性内切酶、T4连接酶、LipofectamineTM2000均购自美国Invitrogen公司。胎牛血清购自杭州四季青生物工程材料技术有限公司。……