袁学军，陈永敢，陈光宙，陈忠荫，李艳丽

（琼州学院生物科学与技术学，海南 三亚 572000）

灵芝的生物活性成分十分丰富，丰富的生物活性成分决定了它功能的多样性[1]。据有关研究表明，目前已分离到灵芝的150余种活性成分，有多糖类、核苷类、生物碱类、氨基酸、蛋白质类、三萜类和矿质元素等[2]，具有抗肿瘤、保肝解毒、预防心血管系统疾病、抗过敏、抗衰老、抗神经衰弱、治疗高血压、慢性支气管炎、支气管哮喘等作用[3]。除医学外，灵芝在食品、饮品以及保健品产业都占有一定的市场与地位，具有较高的观赏价值及经济价值[4]。

灵芝既不同于一般药物对某种疾病起治疗作用，亦不同于一般营养保健食品只对某一方面营养素的不足进行补充和强化，它的独特之处主要在于它是在整体上双向调节人体机能平衡、调动机体内部活力、调节人体新陈代谢、提高自身免疫能力，促使全部的内脏或器官机能正常化，从而从根本上达到治病强身保健的目的[3]。目前，国内外学者已经对药用灵芝中活性成分进行不同的研究：灵芝活性蛋白[5-8]、灵芝多糖[9-11]、灵芝三萜[12-14]和灵芝酸[15-17]等。到目前为止，还没有关于不同光照和栽培基质对灵芝活性成分的影响。

1 材料与方法

1.1 材料和药品

1.1.1 材料

灵芝采收后及时将污物清理干净，在60℃的条件下在干燥箱内干燥24 h，然后用20目的粉碎机粉碎，最后用带拉链的塑料带密封备用。

1.1.2 药品

葡萄糖由广州化学试剂厂提供；熊果酸和香草醛由上海晶纯试剂有限公司提供；牛白蛋白和考马斯亮蓝G250由国药集团化学试剂有限公司提供；活性炭、蒽酮、三氯甲烷、磷酸、冰乙酸、氯化钠、硫酸铵、碳酸氢钠、盐酸、氢氧化钠、无水乙醇、硫酸和高氯酸均为分析纯。

1.2 方法

栽培料用直径15 cm、长20 cm印度紫檀的木段，发菌结束后进行3种不同的光照处理。全阳：棚不加遮阳网；半荫：棚加1层遮阳网；全荫：棚加2层遮阳网，其他条件均相同。发菌结束后进行4种不同的基质栽培：椰糠、沙土、沙土+红土、壤土，其他条件均相同。

2 测定方法

灵芝多糖的测定参考蒽酮-硫酸法[18]，用葡萄糖做的标准曲线为：y=0.7622x+0.0122，R2=0.998。

灵芝蛋白的测定参考考马斯亮蓝 G-250法[18]，用牛血清白蛋白做的标准曲线为：y=0.6643x+0.0009，R2=0.999。

灵芝三萜的测定参考直接光度法测定法[19]，用熊果酸做的标准曲线为：y=0.4144x-0.01，R2=0.9934。

1.3 统计分析

用南京农业大学王韶华教授发明的stst软件进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同光照对灵芝活性成分的影响

不同光照对灵芝活性成分的影响见表1。

表1 不同光照对灵芝活性成分的影响

结果显示，多糖的含量3个处理之间差异极显著，其中半荫处理多糖含量最高，全阳处理多糖含量最低。因此，光照中等有利于多糖的合成；蛋白的含量3个处理之间差异极显著，其中全阳处理蛋白含量最高，全荫处理蛋白含量最低，强光照有利于蛋白的合成；三萜的含量3个处理之间差异极显著，其中半荫处理三萜的含量最高，全阳处理三萜的含量最低，光照中等有利于三萜的合成。

2.2 不同栽培基质对灵芝活性成分的影响

不同栽培基质对灵芝活性成分的影响见表2。

结果显示，多糖的含量4个处理之间差异极显著，其中椰糠处理多糖含量最高，可能是由于椰糠中主要是木质素、纤维素、半纤维素等，分解后产生糖，灵芝菌丝吸收糖后有利于灵芝本身糖的合成，沙土处理多糖含量最低，多糖含量又高到低的顺序为椰糠、沙土+红土、壤土、沙土；蛋白的含量4个处理之间差异也极显著，其中椰糠处理蛋白的含量最高，其它由高到低顺序依次是沙土+红土、壤土、沙土；三萜的含量4个处理之间差异极显著，其中沙土处理三萜的含量最高，其它由高到低顺序依次是沙土+红土、椰糠、壤土。多糖和蛋白的含量，4种处理排序相同，但三萜的含量与此排序基本相反。

3 讨论与结论

灵芝多糖、蛋白、三萜类化合物是灵芝中的主要活性物质，也是衡量灵芝质量的重要指标[20]。不同的光照对灵芝活性成分影响的研究，到目前为止还没有文献报道，无法与其他类似的试验数据比较。本实验研究的结果表明，中等光照有利于多糖和三萜的合成，光照较强有利于蛋白的合成。本试验不同栽培基质对灵芝活性成分影响的研究表明，椰糠有利于多糖和蛋白的合成，可能是椰糠中有机物丰富的缘故，但沙土有利于三萜的合成。因此，活性成分的含量受基质的影响较大，同一基质对不同活性成分的影响也不完全相同，有的甚至相反。本研究为提高目的活性成分含量的栽培技术提供技术支持。

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