景鹏宇，梁智星，梁法禹

活性同种瓣膜是心脏瓣膜置换较理想的材料［1，2］，其制备保存方法对瓣膜组织结构及细胞活性影响较大。在常规制取过程中，由于温度、压力等因素骤变，会导致瓣膜各层结构之间产生相互的内应力［3］，从而损伤瓣膜细胞。本实验模拟在体环境，就动脉血流在同种瓣的制备保存中的作用进行初步探讨，期望为改进其质量提供新方法。

1 材料与方法

1.1 实验动物 供体为1个月～1.5个月龄的中国白兔36只，雌雄不拘，体重（0.3±0.1）kg；受体为成年中国白兔12只，体重（3.0±0.5）kg，由山西医科大学动物中心提供。

1.2 移植物准备及分组1.2.1 灭菌培养液配置 RPMI1640营养液＋头孢呋辛钠50 μg／mL＋二性霉素B 2.5μg／mL（pH 值为7.2，渗透压为226 mOsm／kg）。

1.2.2 冻存液配置 RM11640培养液：10%小牛血清：二甲基亚砜（DMSO）为8∶1∶1，－20℃冻存［4］。

1.2.3 带瓣主动脉取材 供体兔腹腔注射戊巴比妥钠（40.0 mg／kg）麻醉，按常规动物实验方法暴露心脏，于主动脉弓分支前剪断。剥离带瓣主动脉，去除壁上结缔组织及脂肪组织。于主动脉瓣根部下缘保留约5mm的心肌纤维和心内膜，同时保留二尖瓣大瓣，将其修剪成瓣下主动脉壁的一部分。血管长1.2 cm～1.5cm，并缝扎两冠状动脉开口。

1.2.4 带瓣主动脉的灭菌培养 将修剪后的带瓣血管放入灭菌培养液中，在37℃ 含5%CO2的培养箱中灭菌12h。

1.2.5 分组 将以上标本随机分为A组、B组、C组。A组作为对照组，深低温液氮保存；B组、C组作为实验组，颈动脉移植后深低温液氮保存。

1.3 实验组处理

1.3.1 同种带瓣主动脉移植 受体兔耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠（1mL／kg）麻醉，游离双侧颈动脉。将一侧颈动脉两端上动脉夹（间隔1.2cm～1.5cm），中间剪断。……