秦军燕，陈 文，夏寅强，瞿德敬，方国臻，王 硕

（天津科技大学食品工程与生物技术学院，食品营养与安全教育部重点实验室，天津300457）

HPLC-MS法测定食品中生物碱的研究

秦军燕，陈 文，夏寅强，瞿德敬，方国臻，王 硕*

（天津科技大学食品工程与生物技术学院，食品营养与安全教育部重点实验室，天津300457）

建立了一种高效液相色谱电喷雾质谱（HPLC-ESI-MS）法同时测定食品中六种生物碱的方法。采用ZORBAX SB-C8（2.1mm×150mm，3.5μm）色谱柱，乙腈（A）和pH5的4mmol/L乙酸铵溶液（B）为流动相，梯度洗脱使所有分析物均达到基线分离。采用ESI+一级质谱扫描模式得到甜菜碱、胆碱、苦参碱、阿托品、马钱子碱和乌头碱的定性离子，分别为m/z 118.2、104.2、249.5、290.3、395.4和646.4，结合质谱保留时间检测六种生物碱。结果表明，采用1.0mg/mL混合标准溶液，准确性好，RSD＜0.59%。该方法应用于检测实际样品荒漠肉苁蓉、山药、宁夏枸杞，添加回收率分别为81.7%～112.9%、80.8%～117.5%、96.9%～119.3%，说明建立的方法可以快速准确的检测实际样品中的生物碱成分。

高效液相色谱，电喷雾质谱，生物碱，实际样品

Abstract：An high-performance liquid chromatographic electrospray ionization mass spectrometry（HPLC-ESIMS） method was developed for the identification of 6 alkaloids in food.A mixture of acetonitrile（A） and pH5 4mmol/L ammonium acetate aqueous solution（B） were used as the mobile phase for the chro-matographic separation on ZORBAX SB-C8（2.1mm×150mm，3.5μm） column in the gradient elution mode.Under positive electrospray ionization mode，the protonated molecular[M+H]+ions for betaine（m/z 118.2），choline（m/z 104.2），matrine（m/z 249.5），atropine（m/z 290.3），brucine（m/z 395.4） and aconitine（m/z 646.4） and retain time were obtained as qualitative analysis.The experiment results indicated that RSD of the precision was less than 0.59%for adding 1.0mg/mL of spike standard.This method was used in the actual sample Herba Cistanche，Rhizoma Dioscoreae，Lycium bar-barum L testing and the average extraction recoveries were in the range of 81.7%～112.9%，80.8%～117.5%，96.9%～119.3%.A simple，rapid and accurate identification of 6 alkaloids was successfully achieved using the method.

Key words：liquid chromatography；electrospray ionization mass spectrometry；alkaloids；actual sample

肉苁蓉、枸杞和山药既是名贵的中药材，又是食疗同源的滋补产品，具有抗肿瘤、增强人体免疫力及维护心血管健康等功效。根据报道枸杞、肉苁蓉和山药均含有大量活性成分生物碱[1-4]，目前对该成分的检测方法有比色法[5]、高效液相色谱法[6-8]、液相质谱联用法[9-11]等。比色法测定过程复杂，而且需要乙醚等有机试剂，对人体危害较大。由于甜菜碱和胆碱结构中无共轭体系，高效液相色谱法仅能在低紫外吸收波长条件下测定，条件要求较高，灵敏度不够理想，或是衍生操作相对繁琐。……