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鸭肠炎病毒gL蛋白在鸡胚成纤维细胞中动态表达的检测

2012-09-11李慧昕韩宗玺邵昱昊刘小丽孔宪刚

中国预防兽医学报 2012年1期
关键词:检测研究

李 冰,李慧昕,王 钰,韩宗玺,邵昱昊,刘小丽,孔宪刚

(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所禽传染病研究室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001)

鸭病毒性肠炎(Duck viral enteritis,DVE)是由鸭肠炎病毒(DEV)引起的鸭、鹅及多种雁型目禽类的一种急性、败血性传染病。该病于1923年首次在荷兰报道[1],后陆续在多个国家均有报道,1967年至1995年间,美国多个州爆发鸭病毒性肠炎疫情[2]。我国于1957年由黄引贤首次报道该病[3],该病多发生于养鸭业较发达的地区,给养鸭业造成重大的经济损失[4]。

DEV为疱疹病毒科成员[5],基因组为双股线性DNA。DEV粒子具有疱疹病毒的典型特征[6],其囊膜糖蛋白主要包括 gB、gC、gD、gE、gH、gI、gK、gL、gM、gN和gJ。目前已知疱疹病毒侵入细胞至少需要4种糖蛋白的参与,即gB、gD、gH及gL。首先,gD作为受体结合蛋白,与宿主细胞膜上的受体相结合,激活膜融合系统,随后由gB和gH/gL二聚体执行膜融合功能[7]。gL蛋白必须与gH蛋白形成二聚体才能发挥其膜融合功能,在病毒的入侵及细胞与细胞间感染中,gL蛋白能够促进gH蛋白在感染细胞内进行正确折叠并转运至细胞膜表面[8]。有研究表明,这两种蛋白的共表达能够刺激机体产生中和抗体[9],在诱导机体产生免疫应答作为保护性免疫方面也起到重要作用[10]。

本研究对DEV gL蛋白进行原核表达并制备抗血清,检测gL蛋白在病毒复制过程中的动态表达情况,为其生物学功能的研究奠定基础,同时也为进一步研究gL蛋白在DEV侵染过程中的功能提供依据。

1 材料和方法

1.1 主要实验材料 DEV Clone-03株和293T细胞由本研究室保存;……

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