副猪嗜血杆菌CDT亚基原核表达及其抗原性鉴定
2012-08-30李军星王一成袁秀芳徐丽华曹会敏申世川张鲁滨
李军星,王一成,袁秀芳,徐丽华,曹会敏,申世川,张鲁滨
(浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州 310021)
副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)是猪Glasser's病的病原体,猪上呼吸道的一种共栖菌,它可以在特定条件下侵入机体从而引起以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征的全身性疾病。H.parasuis的毒力因子尚不明确,外膜蛋白、荚膜多糖、脂多糖、菌毛、神经氨酸酶等被认为与H.parasuis的致病性有关[1]。对H.parasuis血清5型高致病性菌株SH0165的全基因组测序表明,其中存在很多毒力相关基因,如细胞致死性膨胀毒素基因(Cytolethal distending toxin,CDT)、oapA脂蛋白基因等,但这些基因与细菌毒力的关系有待于研究[2]。
CDT是多种革兰氏阴性致病菌的毒力因子。完整的CDT是由3个不同亚基组成的三聚体,即cdtA、cdtB及cdtC。对其它细菌的CDT的研究表明cdtB亚基是CDT毒素的活性中心,具有Ⅰ型脱氧核糖核酸酶(DNaseⅠ)活性,可以诱导多种哺乳动物细胞凋亡[3]。目前所发现的CDT的主要功能是破坏真核细胞的染色体DNA,进而引起细胞凋亡。一方面,它可以抑制上皮细胞增殖,并诱导其凋亡,破坏机体黏膜组织,从而有助于细菌侵入机体;另一方面,它可以抑制宿主免疫细胞的增殖,导致局部的免疫抑制。因此,CDT在细菌与宿主的相互作用中发挥重要作用。本实验对H.parasuisCDT 3个亚基进行原核表达,并证明表达产物具有良好的抗原性,为进一步研究其生物学功能奠定基础。
1 材料和方法
1.1 主要实验材料H.parasuisXS090923-1分离株由本实验室分离鉴定保存;H.parasuis自然感染阳性猪血清分离于浙江省某猪场临床典型病例。……
