宋建领，张富强，李华春*，杨仕标，王金萍

（1.云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室，云南昆明 650224；2.成都军区疾病预防控制中心，云南昆明 650032）

禽流感（Avian influenza，AI）是由A型禽流感病毒（AIV）引起的一种禽类的感染性疾病综合征。近年来，H5N1和H9N2亚型AIV的暴发，特别是H5N1亚型AIV突破种间屏障感染人的病例[1]，赋予AI全新的公共卫生意义。AIV属于正粘病毒科流感病毒属A型流感病毒成员。AIV基因组由8个节段的单股负链RNA组成，编码10种病毒功能蛋白。病毒第7节段RNA转录过程中，经剪接、编辑合成两条不同的mRNA，翻译合成M 1和M 2基质蛋白。M 1是病毒的主要结构蛋白由252个氨基酸残基组成，分子量约26 ku，占病毒蛋白总量的30%～40%。该蛋白具有型特异性，其抗原性差异是流感病毒分型的依据之一。M 1在病毒复制中还具有重要的调节功能[2]，如控制病毒的转录和被感染细胞的胞核胞浆之间的物质运输[3]。研究表明8位～89位、80位～109位、129位～164位氨基酸区域至少各存在一个B细胞表位，89位～141位氨基酸区域内至少存在2个B细胞表位，存在2个RNA结合位点[4]，羧基端238QAYQKRMGVQMQRFK252肽构成 CD4+T细胞表位[5]，58位～66位（58GILGFVFTL66）氨基酸构成 CD+8细胞毒性 T细胞表位[6]，63位～70位（63FVFTLTVPS70）氨基酸构成CD+4 T细胞表位[7]。

本实验室前期进行了AIV M1、N1和N2基因克隆、表达，获得具有良好抗原性的表达产物[8-10]；并应用噬菌体展示随机12肽库，确定了AIV M1蛋白222位～230位氨基酸（222HPNSSARLR230）构成一个型特异性表位[11]。在此基础上，本研究采用针对AIV的M 1蛋白型特异性单克隆抗体（MAb），淘选M 13噬菌体展示的7肽随机肽库，获得与MAb特异性结合的噬菌体拟位，比对分析噬菌体拟位的共有序列，在病毒M 1蛋白中鉴定相同（似）区域，结合不同噬菌体拟位与MAb的免疫反应性分析结果，进一步进行M 1蛋白表（拟）位分析。……