苑 丽，吴 华，潘玉善，刘建华，胡功政

（河南农业大学，河南郑州 450002）

目前禽源临床分离致病菌的多重耐药现象较为严重[1-4]，为兽医临床有效防控该细菌病造成了一定困难。细菌获得多重耐药的因素有很多[5]，其中临床不合理用药是重要的原因之一。为研究临床用药对细菌产生耐药性的影响，本实验选取临床分离株LG30鸡源大肠杆菌（Escherichia coli）和标准株O78为研究对象，采用亚抑菌浓度的头孢曲松或头孢噻肟单药为诱导药物，检测不同诱导期的诱导菌对常用药物的耐药性变化，为临床合理用药及进一步研究禽源分离菌的多重耐药机制奠定基础。

1 材料和方法

1.1 主要实验材料 受试菌株LG30鸡源E.coli为本实验室临床分离鉴定并保存；标准株O78购自中国兽药监察所；氨苄西林（新乡华星药厂，含量89.6%，批号070803）、头孢曲松（广州白云山制药总厂，含量94.8%，批号070860）、头孢噻肟钠（齐鲁动物保健品有限公司，含量89.1%，批号070400301）、头孢噻呋（美国法玛西亚普强公司，含量95.8%，批号070406）、盐酸头孢吡肟（悦康药业集团有限公司，含量89.4%，批号0705051）、加替沙星（台州外高桥联通药业有限公司，含量99.5%，批号061022）、恩诺沙星（浙江康裕制药有限公司，含量98%，批号070509）、克林沙星、庆大霉素、阿米卡星、氟苯尼考等均为国产药，使用时均在有效期内。

1.2 菌种复活及培养 将各保存菌液50μL分别接种于5 ML LB肉汤中，37℃培养18 h～24 h，接种于LB琼脂平板，37℃过夜培养。次日，分别挑取平板上1～2个典型菌落接种于LB肉汤，37℃培养18 h～24 h，4℃保存作为种用。

1.3 体外药敏试验 参照CLSI（2010）[6]推荐的微量稀释法测定各受试药对细菌的最小抑菌浓度（M inimal inhibitory concertration，M IC）值，并分析各受试药物的耐药率。……