张文通，魏 凤，王金良，肖跃强，沈志强,

（1.山东绿都生物科技有限公司，山东滨州 256600；2.山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州 256600）

猪圆环病毒 2型（Porcine circovirus type 2，PCV2）是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症（Postweaningmultisystemic wasting syndrome，PMWS）的主要病原[1-2]。PMWS主要发生于5周～12周的断奶仔猪，其临床症状主要表现为进行性消瘦、呼吸道症状、发热、苍白及黄疸等。病原学及血清学调查表明，该病在许多国家广泛存在，给养猪业造成严重的经济损失。因此，建立一种PCV2抗体的快速检测方法，为该病的预防提供依据十分重要。

PCV2包括两个主要的开放阅读框：ORF1和ORF2；ORF2编码的Cap蛋白是PCV2主要结构蛋白。Truong等研究表明，ORF2抗原表位可以作为PCV2实验猪及自然感染猪血清学检测的标志[3]。目前诊断PCV2的血清学方法主要有ELISA、免疫酶组织化学染色法和免疫荧光等方法。但这些方法由于费时或成本高等因素的制约，只能用于实验室的诊断，不适合大量样品的检测。本实验应用胶体金标记技术，根据免疫层析原理，用胶体金标记葡萄球菌蛋白A（SPA）作为探针，用纯化的重组ORF2蛋白和健康猪IgG分别作为检测线和对照线试剂，研制一种PCV2抗体胶体金试纸条。该试纸条具有检测快速和使用方便等优点，可以适用于临床样品的大量检测，为PCV2抗体检测提供了有效的工具。

1 材料和方法

1.1 病毒株、重组菌及血清 SPA购自Prospec公司；猪圆环病毒抗体检测ELISA试剂盒、pKGORF2/BL21重组菌以及猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪瘟病毒（HCV）、猪细小病毒（PPV）、猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病毒（PRV）、PCV2免疫血清均由滨州畜牧兽医研究院制备保存。……