潘爱珍，赵秀芹，张媛媛，王晓萌，柳正卫，万康林

2.浙江省疾病预防控制中心，杭州 310051

近年来，结核病耐药问题已成为全球公共卫生关注的焦点，尤其是耐多药和广泛耐药。异烟肼作为常用的一线抗结核药物，对病人的治疗发挥重要作用。全球范围内，异烟肼总耐药率13.3%，初治结核病例耐药率10.3%，复治病例耐药率27.7%；在我国，异烟肼总耐药率18.96%，初治结核病例耐药率16.01%，复治病例耐药率38.51%，各项均高于全球水平［1］。因此对异烟肼耐药性快速诊断很有必要。

研究表明，结核分枝杆菌异烟肼耐药性的产生与katG、inh A、kasA、ahp C和ndh等多基因的突变相关［2］，但60%～70%的耐药株是由于katG基因第315位密码子突变所致［3］，且这一突变与高耐药量密切相关［4］。因此，katG基因是异烟肼耐药性检测的首选基因。本研究的目的是针对常见异烟肼耐药位点katG315建立Taq Man－MGB荧光定量PCR技术，以达到快速诊断结核分枝杆菌异烟肼耐药，为临床提供及时有效的化疗指导。

1 材料与方法

1.1 阳性对照标准株 FAM－MGB野生型阳性标准菌株H37Rv，购自中国药品生物制品检定所。HEX－MGB突变型阳性标准菌株FJ07063，katG315 G→C，背景明确且稳定的菌株。由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所结核病室传代培养、保藏。

1.2 实验菌株 130株结核分枝杆菌临床分离株均由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所结核病室提供，包括71株结核分枝杆菌临床分离株katG315位点测序结果为野生型G，57株315位密码子G→C，2株315位密码子G→A。

1.3 16株非结核分枝杆菌标准株 鸟分枝杆菌95001、胞内分枝杆菌95002、蟾分枝杆菌95003、施氏分……