甲型H1N1流感病毒HA基因与沙门菌flj B基因的融合表达与鉴定＊

2012-08-21潘志明马全刚康喜龙耿士忠焦新安

中国人兽共患病学报 2012年1期

关键词：融合

杨芸，潘志明，马全刚，张磊，康喜龙，耿士忠，焦新安

目前，国内外对甲型H1N1流感的防治主要采用灭活裂解疫苗进行免疫预防，效果确实，在疾病的防治中发挥了巨大的作用［1］。但是灭活苗也存在一些缺陷，如不能有效激发细胞和黏膜免疫应答等［2］。因此，有必要研究一种安全、高效的新型甲型H1N1流感疫苗以弥补上述不足。

血凝素（hemagglutinin，HA）是流感病毒的一种主要保护性抗原，诱导中和抗体。HA裂解为HA1和HA2两个亚基，这两个亚基通过一个二硫键连接。HA1亚基参与细胞受体结合，HA2亚基则在病毒与细胞膜融合中起主要作用［3］。

研究显示，鞭毛蛋白被细胞TLR5（Toll－like receptor 5，TLR5）分子识别后，激发机体产生先天性免疫应答，继而启动并促进针对外源抗原的获得性免疫应答，包括体液免疫、细胞免疫以及局部黏膜免疫，显示出鞭毛蛋白免疫佐剂的特性［4－5］。鞭毛蛋白由D0、D1、D2、D3四个功能区域构成，其中D1区域是高度保守区域，含有TLR5结合位点，D2和D3则构成其高变区［6］。研究表明抗原序列插入鞭毛蛋白的末端或高突变区，都不会影响TLR5信号途径，但是这些插入位点对抗原序列具有选择性［7］。

本实验将 A/California/05/2009 H1N1 HA片段 HA1－2（K62－S284）通过柔性肽连接到鼠伤寒沙门菌Ⅱ型鞭毛蛋白的N端，利用大肠杆菌原核表达系统表达出融合蛋白，以期为新型甲型H1N1流感疫苗的研发奠定基础。