索南元旦

（青海省玉树州畜牧兽医工作站，青海玉树815000）

新城疫（Newcastle disease，ND）是由副黏病毒科（Paramyxoviridae）副黏病毒亚科（Paramyxovirinae）禽腮腺炎病毒属（Avulavirus）的新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）引起的禽类高度接触性、烈性传染病，被世界动物卫生组织（OIE）列为必须报告的动物传染病，呈世界性分布，每年全球因鸡新城疫所造成的直接经济损失达数十亿元，是危害全球养鸡业的最重要传染病之一［1-5］。该病也是影响我国养禽业健康发展的重要疫病之一，对我国禽类产品的食品安全以及人类健康都存在着潜在危害［6-7］。NDV常规的病毒分离技术和分子生物学检测方法存在周期长、操作复杂等缺点，无法满足基层兽医部门大批量样品检测的需要。NDV基因组全长15186bp，编码6种结构蛋白，其中血凝素-神经氨酸酶糖蛋白（HN）为病毒囊膜蛋白，是病毒复制必需蛋白，为病毒特异性保护性抗原，存在中和B细胞抗原表位，能够诱导机体产生特异性免疫应答，是NDV诊断试剂研究的常用蛋白［8-11］。本研究以重组HN蛋白为包被抗原，建立了一种简单、快速、特异、敏感新城疫病毒抗体检测方法，为基层兽医部门新城疫病毒抗体的检测、监测及流行病学调查等提供一种有效的检测技术。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 抗原与血清 原核表达的新城疫病毒重组HN蛋白由青海省动物疾病中心实验室制备并保存。H9亚型禽流感病毒（H9AIV）、传染性支气管炎病毒（IBV）、鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）、减蛋综合征病毒（EDSV）阳性血清及NDV参考阴性、阳性血清均购自中国兽医药品监察所。检测用血清样品由青海省动物疾病中心实验室收集并保存。……