伍晓红，储岳峰，张 轩，赵 萍，高鹏程，贺 英，逯忠新＊

（1.中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 农业部草食动物疫病重点开放实验室，甘肃兰州730046；2.西藏昌都左贡县兽医站，西藏左贡854400）

牛支原体（Mycoplasma bovis）主要引起牛的肺炎、关节炎、乳房炎、角膜结膜炎等［1］。该病原于1961年首次在美国患有乳房炎的病牛中分离得到，之后在欧洲和北美流行并造成了严重的经济损失［2］。辛九庆等［3］首次在国内患肺炎犊牛的肺脏中分离到牛支原体，从而证实了国内部分地区也存在牛支原体肺炎的流行。冉智光等［4］又从患严重肺炎和关节炎的调入肉牛中分离出了牛支原体，进一步证实牛支原体感染已经对中国部分地区养牛业的发展造成了严重的影响。

有关研究报道，在健康牛呼吸道中几乎分离不到牛支原体，只有在感染牛的呼吸道中能够分离到，并经常引起临床发病［5］。近年来，在我国不同地区相继有犊牛肺炎病例发生，由于在临床症状和病理剖检变化方面与牛传染性胸膜肺炎非常相似，曾引起养牛业界的恐慌［6］。2011年，甘肃通渭某牛场出现严重的犊牛呼吸系统感染，主要表现为肺炎症状，病死率达10%。本研究对送检的犊牛肺脏病料进行了支原体分离和鉴定，并通过16 S RNA基因测序进行了分子鉴定，证实为牛支原体。

1 材料与方法

1.1 材料

采集甘肃通渭发病犊牛病变肺脏样品2份；用Thiaucourt＇s支原体培养基分离［7］。

1.2 方法

1.2.1 病原分离 无菌取约1 g肺组织，加2 mL液体培养基研磨匀浆，1 000 r／min离心5 min取上清，按1∶10倍比稀释接种至液体培养基中，每个稀释度接种2管，共接种3个稀释度，置37℃培养。……