彭 宜，谢芝勋，刘加波，庞耀珊，邓显文，谢志勤，谢丽基，范 晴，罗思思

（广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室，广西南宁530001）

禽流感（Avian influenza，AI）是由禽流感病毒（AIV）引起的禽流行性感冒的简称［1］。根据AIV表面糖蛋白血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）抗原性不同，AIV可分为16个HA亚型和10个NA亚型［2－3］。禽流感据其临床症状又可分为高致病性禽流感（Highly pathogenic avian influenza，HPAI）和低致病性禽流感（Mildly pathogenic avian influenza，MPAI）。HPAI由H5、H7亚型AIV引起，以高发病率和高病死率为特征。MPAI可由所有的HA亚型（H1－H16）AIV引起，通常引起较温和的临床症状［4－5］。随着 H5、H7亚型 HPAI的暴发，MPAI没有引起人们足够的重视，直到1999年香港H9N2亚型禽流感病毒感染人的事件才引起世界对MPAI的关注。有关研究还表明1997年香港人源H5N1亚型 AIV 与 A／Teal／HK／W 312／97（H6N1）有7个基因片段高度同源［6－7］。越来越多的研究表明家禽中的低致病性禽流感病毒（MPAIV）可以通过基因重排为感染人类的流感病毒提供基因或直接突破种间屏障感染人［8－12］。禽流感不仅给养殖业带来巨大经济损失，而且严重威胁人类健康，因此有必要利用快速简便特异的检测技术加强AIV的病原学监测工作。

环介导等温扩增技术（loop－mediated isothermal amplification，LAMP）是近年来发展起来的在等温条件下进行的新型核酸扩增反应，该技术具有灵敏、特异、结果便于观察等优点而被广泛应用于各种病原微生物的检测［13－19］。本研究设计了针对AIV M基因的特异性LAMP引物，并优化相关反应条件，建立的 AIV 逆转录－环介导等温扩增 （RTLAMP）检测技术灵敏、特异，并实现了反应结束即可用肉眼直接对结果进行可视化判定，整个反应操作简便、快速、成本低廉，尤其适合在基层进行AI的早期诊断和大规模筛查。……