杨胜男，郑增忍，张乐萃，王 娟，曲志娜，黄秀梅，李玉清

（1.青岛农业大学，山东青岛266109；2.中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛266032）

弯曲菌（Campylobacter）是重要的食源性人兽共患病原菌［1］，可引起人和动物的各种疾病，如人类发热、急性肠炎和格林-巴利综合征［2-3］。在兽医学上，可引起家畜流产、不孕、乳房炎及幼畜禽腹泻和家禽肝炎［4］。家畜和野生鸟类是其常见宿主，人类常因为摄入被污染的食物和饮水而感染［5］。而家禽类尤其是鸡源产品更是弯曲菌感染传播的重要途径［6］。因此，研究弯曲菌具有重要的公共卫生学意义［7］。弯曲菌培养条件十分苛刻，25℃不生长，42℃生长较好，微需氧条件，普通培养基上生长不良，生长需要万古霉素、多黏菌素B等抗菌药物的血琼脂培养基［8-9］。而常规生化鉴定则耗时费力，过程复杂。本试验优化了弯曲菌的分离培养过程，以利于后续检测工作的进行，并建立空肠弯曲菌的PCR检测鉴定方法。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 空肠弯曲菌标准菌株ATCC 33560由中国动物卫生与流行病学中心实验室提供，大肠埃希菌ATCC25922购自中国兽药监察所，金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC 29213购自中国药品生物制品检定所。

1.1.2 试剂及培养基 弯曲菌CCDA琼脂、哥伦比亚血琼脂基础为英国OXOID公司产品；绵羊全血为青岛海博生物科技公司产品；TTC琼脂为北京陆桥生物科技公司产品；2×Taq PCR Master Mix、PCR Marker为宝生物工程（大连）有限公司产品；厌氧罐、微需氧产气袋为日本MGC公司产品；常规试剂为国产分析纯试剂。

1.1.3 样本采集 采集青岛地区鸡盲肠包装，低温条件下运送至实验室。……