王亚男，宋军科，赵光辉，边青青，于三科

（西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌712100）

寄生于宿主食道黏膜下的美丽筒线虫（Gongylonema pulchrum）是一种细线状、乳白色的线虫，属于旋尾目筒线科，呈世界性分布［1］。其宿主范围十分广泛，以包括灵长类在内的多种哺乳动物为终末宿主，如牛、绵羊、山羊、骆驼、猪、马、鹿、熊、啮齿类动物等［2-5］，以金龟子和蟑螂为其中间宿主［6］，偶尔可在人体寄生，人体寄生的最早病例是由Leidy［7］在美国费城发现的。此后世界各地陆续有散在的病例报道。中国自1955年在河南发现第1例病人后，迄今已报道百余例，分布于山东、黑龙江、辽宁、内蒙古、甘肃、陕西、青海、四川、北京、河北、天津、河南、山西、上海、江苏、湖北、湖南、福建、广西等19个省（市、区），其中山东报告的病例最多［8-13］。人感染美丽筒线虫后常表现精神症状如妄想症等［14］，动物感染造成动物渐进性消瘦，影响其生产性能。

美丽筒线虫形态学鉴定较为困难，常因需要专家等不能普及应用，需要一种更为准确、方便、普及的检查方法。核糖体内转录间隔区（internal transcribed spacer，ITS）序列有着显著的株间差异，可揭示种间甚至种内多态性，已被广泛用于寄生虫分子学鉴定和变异分析。

本研究对采自陕西神木的美丽筒线虫进行ITS的PCR扩增、克隆、测序及序列分析，以期为美丽筒线虫的分子鉴定提供基础资料［15-17］。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 虫体 采自陕西省榆林市神木县山羊食道分离出的食道寄生虫，经过初步形态学鉴定为美丽筒线虫［6］，样品代码为 G.P，在750mL／L酒精中保存，用于提取DNA。……